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玉米大斑病菌G蛋白β亚基编码基因的克隆与表达
  • ISSN号:1674-7968
  • 期刊名称:《农业生物技术学报》
  • 时间:0
  • 分类:S188[农业科学—农业基础科学]
  • 作者机构:[1]河北农业大学植物分子病理学实验室,保定071001, [2]河北大学附属医院,保定071000
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30471126)和河北省自然科学基金项目(No.C2008000335)资助.
中文摘要:

研究克隆了玉米大斑病菌(Setosphearia turcica)G蛋白β亚基编码基因Stgb-1。Stgb-1基因全长1296bp,由5个外显子和4个内含子组成;开放阅读框(ORF)为1056bp,编码351个氨基酸,蛋白质计算分子量为39.081kD。其推导氨基酸序列与Cochliobolus heterostrophus、Cryphonectria parasitica和Aspergillus fumigatus的G蛋白β亚基编码基因均具有较高的同源性,分别为100%、80%和81%。将该序列提交GenBank登录号为No.EF407555。利用RACE(rapid amplification of cDNA ends)和Genomic walking技术获得了Stgb-1基因3′末端cDNA和3′端DNA侧翼序列,BlastN结果表明其cDNA3′-UTR为136bp,poly(A)由9个A构成。构建了pET28a-Stgb-1原核表达载体,SDS-PAGE检测和Western blot鉴定结果表明,目的蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中诱导表达。

英文摘要:

Stgb-1 gene from the phytopathogenic fungus of Setosphearia turcica, which encoded a protein of 351 amino acid residues, was 1 296 bp and interrupted by four introns. It shared a high degree of amino acid homology with Gβ protein from Cochliobolus heterostrophus, Cryphonectn'a parasitica and Aspergillus fumigatus, which was 100%, 80% and 81%, respectively. The sequence has been deposited in the GenBank/EBI Database(accession No. EF407555). Results of RACE (rapid amplification of eDNA ends) and Genomic walking showed a 136 bp 3′UTR in its 3′ end eDNA with a poly (A) tail containing nine adenylates. The pET vector system was used to express Stgb-1 in vitro. Results of SDS-PAGE and Western blot showed that the recombinant protein with the calculated molecular mass of 40 kD was expressed in Escherichia coll.

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期刊信息
  • 《农业生物技术学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中国农业大学
  • 主编:武维华
  • 地址:北京市海淀区圆明园西路2号中国农大生命科学楼1053
  • 邮编:100193
  • 邮箱:nsjxb@cau.edu.cn
  • 电话:010-62733684 62731615
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-7968
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3342/S
  • 邮发代号:2-367
  • 获奖情况:
  • 在《中国学术期刊评价研究报告》(2009-2010年)...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国乌利希期刊指南,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:15081