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中文摘要：
本项目以人食管癌组织标本为研究对象，建立食管上皮正常和癌组织体外培养系统,通过磷脂酶信号分子多重量复合物的分离和蛋白组学分析，从食管癌血瘀证和其他证候癌组织中鉴定出证特异性信号蛋白质分子，查明该分子与信号蛋白质的相互作用，观察证候相应方剂作用的异同，以揭示信号分子相互作用和转导的变化与食管癌血瘀证和其他证候的关系，为阐明食管癌癌变机理提供新证据，发现方证特异性相关分子，提供新药开发靶蛋白质和蛋白质之间相互作用。本研究将会为中医证候和方证相关性探讨方面创立新范例，促进中医药分子生物学研究。
结论摘要：
本项目以人食管癌组织标本为研究对象，建立食管上皮正常和癌组织体外培养系统,通过磷脂酶信号分子多重复合物的分离和蛋白组学分析，从食管癌血瘀证和其他证候癌组织中及证候相应方剂作用后鉴定出53种方证相关蛋白质分子，其中31种蛋白质是首次在食管癌组织和细胞中发现，进而对食管癌方证磷脂酶信号分子复合物进行分离和分析，发现食管癌组织和细胞中PLC-γ1、PLD1、EGFR超量表达、蛋白酪氨酸磷酸化增强；PLC-γ1与EGFR和PLD1直接结合，PLD1和PKCα直接结合，PLD1与Actin、PIP2直接结合，在痰气交阻证和血瘀证食管癌组织中PLC-γ1和EGFR结合增加，在食管癌血瘀证组织中PLC-γ1与EGFR和PLD1直接结合，在津亏热结证和气虚阳微证食管癌组织中PLD1和PKCα结合增加，在痰气交阻组织中PLC-γ1与EGFR和SOS1直接结合，PLD与Actin结合在各证型中并无明显差别,食管癌证方分别对相应证候食管癌细胞蛋白质的结合和磷酸化具有抑制作用。本研究为进一步研究食管癌的癌变机理、中医证候分子病机和诊断及方药作用分子机理提供了基础，为中医证候和方证相关性探讨方面创立新范例。
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