建立牛原始卵泡体外培养体系,观察原始卵泡体外激活和生长的全过程,探讨颗粒细胞和卵母细胞被激活的时序性和相互作用。利用原位反转录聚合酶链式反应技术PCR (in situ RT-PCR),以增殖细胞核抗原(PCNA) 基因转录的mRNA作为卵子发育启动的标志物,研究不同激素和生长因子对于卵泡发育的影响,探讨原始卵泡发育启动的机理和相关物质的作用机制。同时利用免疫组织化学方法、蛋白质印迹以及间接免疫荧光技术对MAPK及其底物之一p90rsk在卵泡发育过程中的表达与活性、卵母细胞体外成熟过程中MAPK的表达及激活以及MAPK级联对微管组装及染色体行为的调节作用进行了研究。
英文主题词bovine primordial follicle;initiation of development;oocyte maturation;MAPK signal cascade