中文摘要：

UCH-L1在脑与生殖腺特异性高表达。本研究组以往的研究证明UCH-L1参与蟾蜍卵母细胞的成熟过程,尤其是卵母细胞G2/M相的过渡。预实验表明，UCH-L1不仅能够在离体情况下和小鼠MPF组分结合，而且与Ptov1蛋白等特异结合；同时发现UCH-L1和Ptov1在小鼠卵母细胞的分布与雌激素调节有关。在前期研究基础上，本项目将利用重组过表达和siRNA干扰基因表达技术，分析UCH-L1和Ptov1之间的相互影响，二者在卵母细胞内分布的关联性；进一步确定其与MPF的关联性，以及与卵母细胞发育和成熟的关系。利用离体实验，验证雌激素对UCH-L1和Ptov1在卵母细胞中分布的影响，及相关的调节机制；进一步分析其对MPF的影响，以及其调控卵母细胞发育成熟的分子信号传递途径。

结论摘要：

在以往发现蟾蜍tUCHL1参与卵母细胞成熟调节的基础上，利用亲和吸附实验，发现在小鼠卵巢蛋白提取物中Uchl1可以特异结合并分离出Ptov1蛋白。UCHL1主要报导与神经退变有关，而PTOV1与前列腺癌发生有关。我们发现Uchl1和Ptov1在小鼠的卵泡内高表达，并发现二者在小鼠卵巢的卵母细胞以及胚胎着床位点存在关联。利用小鼠模型，发现Uchl1和Ptov1受雌孕激素调节，参与卵母细胞发育和成熟，同时与子宫内膜的蜕膜化有关。引进的Uchl1基因缺陷小鼠存在生殖障碍，验证了离体实验结果。为了进一步研究有关的作用机制，借助蛋白质亲和吸附与蛋白质谱鉴定技术，发现Uchl1与微管有关蛋白，以及炎症有关蛋白存在关联，因而进一步分析了微管聚合相关蛋白RGS2的作用。另外，我们发现卵母细胞中Uchl1及其关联蛋白的分布在卵母细胞成熟过程中，不随着法尼基转移酶抑制剂的添加而出现变化，提示其质膜分布一旦形成不再依赖法尼基化修饰。借助多种小鼠模型，分析了卵母细胞和精母细胞发育过程中Uchl1与MPF成分的关系，得出雌激素调节作用导致Uchl1等蛋白在细胞内的分布变化，进而影响卵母细胞和精母细胞发育过程中的选择性剔除。有关Uchl1及其关联蛋白参与卵母细胞选择性剔除机制的观点，具有重要的学术价值。在机理研究的基础上，制备了UCHL1单抗，并构建了检测方法，对临床上卵巢有关疾病样本中Uchl1的含量水平进行了检测。发现与输卵管炎症患者比较，多囊卵巢综合征患者卵泡液中具有显著较高的Uchl1蛋白水平，而子宫内膜异位症患者的水平则差异不显著。有关检测方法与结果具有良好的临床应用前景。