中文摘要：

近年来的研究表明系统性红斑狼疮（SLE） CD4+T细胞的自身反应性与CD11a、CD70等基因调控序列低甲基化密切相关。但SLECD4+T细胞基因发生低甲基化的机制不明。我们的前期研究发现Gadd45a能促进人CD4+T细胞CD11a 、CD70启动子序列发生低甲基化，诱导自身免疫的发生。本项目拟在已有的基础上，研究Gadd45a诱导低甲基化的分子机制及在SLE发病中的作用①筛选出可能与Gadd45a共同参与DNA低甲基化的蛋白（unknown蛋白，即U蛋白）；②检测U蛋白在活动性SLE患者CD4+T细胞中的表达；③研究CD11a和CD70基因DNA片段上是否有Gadd45a或U蛋白的结合？④增加或抑制Gadd45a表达的同时，调节U蛋白的表达对 CD4+T细胞CD11a、CD70的表达、甲基化状态和细胞功能的影响。通过这些研究，将阐述SLE CD4+T细胞病理性低甲基化的分子机制。

结论摘要：

目的研究Gadd45a在SLE T细胞DNA病理性低甲基化中的分子机制。方法（略）结果经过免疫共沉淀结合串联质谱分析搜索蛋白数据库，筛选出了HMGB1蛋白。和正常人比较，活动性SLE患者CD4+T细胞HMGB1 mRNA和蛋白表达显著升高。且HMGB1 mRNA和 CD70 mRNA、CD11a mRNA水平呈显著正相关。染色质免疫沉淀结果显示HMGB1未与CD11a和CD70启动子区域结合。和对照组比较，转染Gadd45a-siRNA+HMGB1-siRNA(称之为第2组)与转染Gadd45a-siRNA+ HMGB1-pcDNA3.1（称之为第3组，以下同）的 CD4+T细胞Gadd45a表达均显著下降，转染后HMGB1mRNA和蛋白表达均表明转染成功。且第2组CD11a和CD70蛋白表达均显著下降，第3组CD11a和CD70蛋白表达有所恢复，和对照组无明显差异。和对照组比较，转染后第2组CD4+T细胞增殖活性和B细胞IgG产量最低，第3组CD4+T细胞增殖活性和B细胞IgG产量与对照组比较均无显著差异。甲基化测序显示和对照组比较，第2组CD11a 和CD70启动子多个位点甲基化水平升高，第3组多个位点甲基化水平也升高，并未使第2组的甲基化水平恢复到对照组水平。结论虽然HMGB1与Gadd45a结合，且在SLE发病过程中起重要作用，但Gadd45a和HMGB1均不与甲基化敏感基因CD11a和CD70结合，且HMGB1并未参与到SLE CD4+T细胞低甲基化过程中。发表SCI论文1篇，medline收录论文1篇。会议发言1次，壁报交流1次。