将固氮斯氏假单胞菌肌酐水解酶基因克隆至乳酸菌 L.laetisNZ9000。酶活性较原始菌提高近3倍;较原构建质粒pMG36e一cr提高近6倍。产朊假丝酵母菌的尿酸酶基因克隆至乳酸菌 L.laetisNZ9000,利用乳酸菌NICE系统修饰构建的尿酸氧化酶质粒经转化的乳酸基因工程菌Llactis一PNZ8048一UA,酶活性较原始菌提高3、5倍;较原构建质粒L.laetis一pMG36e一UA提高6、6倍。尿酸酶与肌酐水解酶双基因克隆所构建的基因工程菌喂饲(5/6肾切除)实验性肾衰大鼠4周。分解尿酸、肌酐和硫酸吲哚酚前后差值分别为41.96umol/L, 46.23umol/L和1.43ug/ml.均有非常显著性差异P《0.001。并保留乳酸菌原有功能如抗酸抗胃蛋白酶、抗胰蛋白酶、抑菌作用、肠粘膜粘附及降血脂功能。其遗传稳定性可保持10代。两株基因工程乳酸菌构建成功。为研制安全有效的分解尿酸治疗高尿酸血症和分解多种尿毒素治疗慢性肾衰两种生物制剂奠定了基础。
英文主题词gene recombination;bacterium;lactobacilli;chronic renal failure;enzyme