中文摘要：

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，BRCA1是乳腺癌易感基因，与遗传性乳腺癌相关，但在散发性乳腺癌里的作用尚不明确。本课题组发现BRCA1启动子多态性可影响转录因子与基因的结合能力，改变启动子活性和蛋白表达水平，与乳腺癌的易感性相关，在散发性乳腺癌中尤为显著；初步结果还显示，该多态性有影响乳腺癌预后的趋势。本课题将在前期工作基础上，进一步收集乳腺癌患者的静脉血和临床病理资料，在大样本中分析该多态性与乳腺癌的临床病理特征和预后的关联性，探讨其在遗传性和散发性乳腺癌中是否存在差异；运用生物信息数据库预测并用功能实验证实与之结合的转录因子，采用免疫组化法检测该转录因子在乳腺癌中的表达水平，分析其与乳腺癌临床病理特征和预后的相关性。本课题通过对功能性BRCA1启动子多态性及相关转录因子在乳腺癌中的作用进行系统分析,可为BRCA1基因和乳腺癌的深入研究提供新思路，有望为乳腺癌的防治提供新标靶。

结论摘要：

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。BRCA1和BRCA2基因是重要的乳腺癌和卵巢癌的易感基因,但该基因功能性多态性位点与乳腺癌患者预后的相关性尚不清楚。本课题在获得患者知情同意后，在苏州地区采集了509例临床随访乳腺癌患者的血样和临床病理资料。通过提取基因组DNA，采用通过Taqman等位基因分型技术、限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术、高分辨率熔解曲线技术,Seqeunom和直接测序法等方法，检测BRCA1和BRCA2基因多态性的基因型。在5个BRCA2基因启动子多态性位点(-908A/G,-1134A/G, -1144C/T and -1260CTTAGA/-)的分析中，发现五个多态位点的基因型均符合Hardy-Weinberg平衡定律。在与乳腺癌预后的关联性分析发现，首先发现仅-1144C/T 多态性与乳腺癌的预后有关联,携带TT基因型的患者无病生存期显著延长（P=0.029），该结果在散发单侧性乳腺癌患者中更加显著 (p=0.010)；携带-1144C的单倍型患者的无病生存期显著缩短(p=0.049), 同样，该结果在散发单侧性乳腺癌患者中更加显著 (p=0.018)。此外，在BRCA2 基因11号外显子多态性与乳腺癌预后的相关性研究中，课题组首先发现N991D该多态性与乳腺癌患者的无病生存期相关联，携带ND 基因型的患者无病生存期较长( P=0.033) ，且与淋巴结转移呈边缘相关性(p=0.070) ；而BRCA2基因M784V和M1915T多态性在中国人群中罕见，提示中国人群的遗传背景与外国人群存在差异。在BRCA1启动子多态性的研究中，初步结果显示该多态性有影响乳腺癌患者预后的趋势，在扩大样本量后，结果显示携带T等位基因的患者无瘤生存期显著延长（p=0.043）。另外,对BRCA2基因启动子进行分子克隆并通过定点突变的方法引入突变，通过限制性内切酶酶切和基因测序的方法显示克隆成功，通过双荧光素酶法实验证实克隆的启动子具有活性。本课题获得一些原创性结果，可为深入了解BRCA1和BRCA2基因在乳腺癌中的作用提供新的理论依据，为研究BRCA1和BRCA2基因的研究提供新思路。