淡水涡虫是一种具有强大的再生能力的扁形动物,当身体受损时,称为副胚层的干细胞群便会分化成相应的器官,因此涡虫是一种非常好的干细胞和再生研究模式生物。miRNA作为一类重要的非编码小RNA,在生命活动中起重要的调控作用。本项目利用我们建立的一种新型差减杂交法,构建涡虫干细胞miRNA差异表达文库,筛选差异表达miRNA序列,通过定量PCR研究其在再生和正常组织中的表达差异,生物信息学预测和实验验证确定其靶基因,并通过上调和下调miRNA表达,研究其对损伤修复和再生的调控作用,圆满完成了申请时的计划。同时,还完成了三角涡虫转录组与表达谱研究,完成了37218个基因的组装,并部分注释,对再生相关的基因做了初步的分析,在mRNA水平寻找再生的调控机制,为以后的工作奠定了基础。采用不同方法进行了涡虫miRNA前体预测,分别得到了181条和23条满足条件的miRNA前体序列。完成了涡虫再生相关差异蛋白质组研究,通过质谱技术鉴定21个明显差异性的蛋白点,发现3个有意义的蛋白。以赤子爱胜蚓为再生模式生物,克隆得到了16个在再生组织和正常组织中具有显著的表达差异的miRNA。
英文主题词Planocera; Regenerative; microRNA; Transcriptome