中文摘要：

重型颅脑损伤（SHI）早期肠动力不足发生率高，直接影响救治效果和临床预后。我们前期研究发现嗜酸乳杆菌（La）可明显改善SHI后肠动力不足，但机制尚不明确。研究表明Cx43形成的缝隙连接（GJ）通道保证了肠道平滑肌细胞（SMC）收缩的协调，Cx43表达量及磷酸化与GJ功能密切相关。预实验观察到SHI小鼠ICC与SMC受损，二者间Cx43表达减少；La减轻了ICC和SMC受损程度，上调Cx43表达。据此推测，La改善SHI后肠动力不足的机制与其调节ICC与SMC之间Cx43表达及磷酸化水平有关。为验证这一假说，本研究拟在前期基础上观察La干预前后Cx43表达及磷酸化水平与伤后肠动力的关系，挑选磷酸化位点S368以定点突变方法构建持续磷酸化和Cx43突变细胞模型，以充分阐明缺氧时Cx43表达及磷酸化对细胞通讯的影响，初步揭示La改善SHI后肠动力不足的机制，为益生菌在创伤领域的应用提供理论依据。

结论摘要：

ICC、缝隙连接、平滑肌细胞及肠神经系统（ENS）是肠运动发生的核心要素，其中任一元素的损伤都将导致信号传递不畅，引起肠动力障碍。我们前期研究发现，嗜酸乳杆菌（La）可明显改善重型颅脑损伤（SHI）后肠动力不足，但机制还有待研究。本课题通过建立小鼠SHI后肠动力障碍（IMD）模型，采用生物信息采集和处理系统、激光共聚焦、Western Blot、透射电镜等技术与手段，观察La干预前后SHI小鼠肠道离体肌条收缩、ICC和平滑肌细胞间缝隙连接的形态学、Cx43表达量和蛋白磷酸化水平的变化，获得了以下研究成果①创新改良的自由落体撞击法制备的SHI后IMD小鼠模型死亡率低，稳定性、重复性好。②SHI后肠肌条收缩幅度和频率降低、张力减弱，La可改善伤后肌条收缩障碍。③为了进一步分析La改善肠动力不足的机制，我们以肠动力起搏细胞ICC为研究对象，发现La能减轻SHI后肠肌丛ICC数量减少和网络受损的程度。④通过观察ICC和平滑肌细胞间网络的微观结构发现，La能减轻伤后ICC和平滑肌细胞的线粒体肿胀程度、缩小细胞间间隙、使缝隙连接增多。⑤为了深入探究La对缝隙连接的影响，我们对缝隙连接结构蛋白Cx43进行观察，发现伤后Cx43的蛋白表达量减少，给予La干预后其表达显著增加，提示La通过上调缝隙连接Cx43的蛋白表达，修复SHI后细胞间连接，使ICC和平滑肌细胞间信号传递障碍得以修复。⑥为进一步阐明La促进细胞间信号传递恢复的机理，我们对Cx43磷酸化水平进行了研究，发现La能减少SHI后Cx43蛋白磷酸化的阳性表达，表明La能够维护或修复缝隙连接的形态与功能。⑦同时在研究中发现，La对SHI后与ICC伴行的肠神经也有一定影响，为此进一步观察了La对肠神经递质阳性细胞的作用，发现La能恢复伤后受损AchE细胞的形态，降低NOS的活性，改善细胞数量比例的失衡。上述结果证实了我们提出的“La改善SHI后肠动力不足的机制与其调节ICC-SMC之间Cx43表达及磷酸化水平有关”的假说，为探讨La在严重创伤后患者中的应用提供实验证据。本课题发表中文论著3篇，正在撰写SCI论著1篇，培养硕士研究生4名。