中文摘要：

研究发现，IL-10不但是一种强有力的免疫抑制因子，而且还是树突状细胞（DC）诱导Th2反应的密切相关因子，可以影响DC激发以及对病毒的传输或储存，调节Th1/Th2的平衡。Jamin等已证实猪瘟病毒（CSFV）感染能够诱导IL-10的上调表达。那么,在CSFV感染中，IL-10的上调表达能否通过免疫微环境对机体的免疫调控造成影响？又是如何影响的？本研究以CSFV Shimen株为研究对象，采用重组细胞因子GM-CSF及IL-4诱导的方法培养出DC，然后通过CSFV感染DC及对抗原递呈功能的影响、IL-10对CSFV感染DC的影响，以及采用RNAi技术，构建的IL-10 RNAi质粒对CSFV感染机体后机体免疫调控微环境的影响三个方面的综合研究，深入探讨CSFV感染后IL-10对机体免疫调控微环境的作用机理。

结论摘要：

本项目以猪瘟GSLZ株和疫苗株为研究对象，采用GM-CSF及IL-4诱导的方法成功培养出小鼠和猪外周血DC，并确定了稳定、高效、高纯度细胞的培养条件，然后通过CSFV感染DC及对抗原递呈功能的影响、IL-10对CSFV感染DC的影响，以及采用RNAi技术，对CSFV感染机体后机体免疫调控微环境的影响三个方面的综合研究，深入探讨了CSFV感染后IL-10对机体免疫调控微环境的作用机理。对猪瘟病毒疫C株（疫苗毒）和GSLZ地方株与小鼠髓源非成熟DC（BM-imDCs）相互作用的首次研究发现，C株和GSLZ地方株都可以对BM-imDCs 进行高效感染并在其中增殖。但疫苗株感染能有效促进BM-imDC的成熟，以及异源性初始T淋巴细胞的增殖和分化，进而可以诱导更强的Th 1免疫反应；而GSLZ地方毒株感染，对BM-imDCs的成熟及T淋巴细胞的增殖和分化无明显作用，也不能诱导更强的Th1免疫应答。虽然普遍认为IL-10可以对包括树突状细胞在内的抗原递呈细胞（APCs)的功能产生抑制作用，但其具体作用机制还不清楚。本项目对猪瘟病毒疫C株感染BM-imDC后，IL-10的作用机制研究发现，外源性IL-10可以通过下调表面分子CD80、CD86以及MHC Ⅱ类分子的表达抑制所感染DC细胞的成熟，而自分泌IL-10对所感染DC细胞的成熟状态无此显著性影响。细胞因子检测分析发现，外在的或自分泌的IL-10能显著抑制感染DC分泌IL-12P40；T淋巴细胞增值试验表明，添加或自分泌的IL-10也均能抑制DC刺激异体小鼠初始T淋巴细胞增值的能力。此外，RNAi技术研究结果显示，注射IL-10 RNAi序列对小鼠的免疫应答具有一定的效果，但是在进行CSFV GSLZ株感染后仅导致IL-6分泌量的变化。淋巴细胞亚群流式分析表明，IL-10 RNAi注射后CD3+, CD4+ T细胞数量都高于空白对照组，而CD8+ T细胞数量却在病毒注射后才有所升高；这可能与MHCⅠ和MHC Ⅱ类分子对抗原肽的递呈及刺激免疫应答过程有关。可见IL-10 RNAi对淋巴细胞中的CD4+和CD8+表达在一定范围存在影响。总之，通过本项目深入研究了CSFV感染DC后抗原递呈功能以及IL-10对猪瘟病毒感染后免疫微环境的调控和影响机制。