中文摘要：

巴西橡胶树常规杂交育种周期较长,一般为20-30年，转基因育种技术可以大大缩短这一过程，将成为有效育种途径。本项目建立了橡胶树热研7-33-97品种胚性细胞悬浮培养系。用根癌农杆菌EHA105（携带pCAMBIA1301，含有gusA和hpt Ⅱ）侵染胚性悬浮细胞团，用GUS检测法分析了共培养时间和菌液浓度对转化效率的影响；测定了胚性细胞团对潮霉素和草胺膦（除草剂）的敏感性。结果表明, 适宜共培养时间为3 d，适宜菌液浓度为OD600=0.4-0.6。潮霉素致死剂量为15 mg/L,草胺磷致死浓度为1 mg/L。叶片提取DNA，PCR扩增获得了378 bp的REF启动子片段，该序列与NCBI报道的序列间同源性分别是98.68%和99.47%。胶乳提取RNA，RT-PCR获得了2310 bp的V-PPase基因片段，该序列与报道序列一致。用二者构建了橡胶树乳管特异高效表达载体，进行转化，获得了61个转基因的体细胞胚，经GUS检测和PCR检测证实为转基因体细胞胚。本研究为进一步获得乳管高效表达V-PPase基因的橡胶树转基因新品系奠定了基础。