中文摘要：

对萝卜种子抗真菌蛋白及其基因进行了系统研究，发现该基因在开花45天开始表达，抗真菌蛋白逐渐积累。该蛋白具有较强的耐酸碱性和耐热性，对丝状病原真菌具有广谱抗性。克隆了Rs-AFP1和 Rs-AFP2基因并导入大肠杆菌，获得有抑菌活性的表达产物。通过定点突变改造基因使表达效率明显提高。将Rs-AFP2导入番茄，经检测获得7株阳性植株。采用橡胶树雄蕊培养获得的愈伤组织作为转化受体材料，将Rs-AFP2基因插入pHI121构建含CaMV35S和NptII标记表达载体。采用农杆菌法和基因抢法将构建的表达载体导入愈伤组织块，进行脱分化和再分化培养并进行抗性筛选，获得抗性胚状体，经PCR检测出阳性转化体，说明有外源质粒DNA整合。

结论摘要：

对萝卜种子抗真菌蛋白及其基因进行了系统研究，发现该基因在开花45天开始表达，抗真菌蛋白逐渐积累。该蛋白具有较强的耐酸碱性和耐热性，对丝状病原真菌具有广谱抗性。克隆了Rs-AFP1和Rs-AFP2基因并导入大肠杆菌，获得有抑菌活性的表达产物。通过定点突变改造基因使表达明显提高。将Rs-AFP2导入番茄，经检测获得7株阳性植株。采用橡胶树雄蕊培养获得的愈伤组织作为转化受体材料，将Rs-AFP2基因插入PHI121构建含CaMV35S和NptII标记的植物表达载体导入愈伤组织块，进行脱分化和再分化培养并进行抗性筛选，获得抗性胚状体，经PCR检测出阳性转化体，说明有外源质粒DNA整合。