三种食物中毒性海洋生物毒素融合单链抗体的制备及筛检方法的初步研究-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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三种食物中毒性海洋生物毒素融合单链抗体的制备及筛检方法的初步研究

项目名称：三种食物中毒性海洋生物毒素融合单链抗体的制备及筛检方法的初步研究
项目类别：面上项目
批准号：30671762
申请代码：H2604
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2007-01-01-2009-12-31

项目负责人：柳增善
负责人职称：教授
依托单位：吉林大学
批准年度：2006

中文摘要：

以常见三种中毒性海洋毒素大田软海绵酸（OA）、石房蛤毒素（STX）、河豚毒素（TTX）为研究对象，成功制备了免疫原及检测原OA-IgG、OA-BSA、STX-BSA、STX-OVA、TTX-OVA、TTX-BSA；经细胞融合获得分泌抗毒素单抗的杂交瘤细胞株，大量制备并纯化三种毒素单抗，对抗体效价、亚类、分子量、亲和力、敏感性、特异性等进行测定，结果单抗具有较高的特异性、敏感性、亲和力和效价；以单抗为基础建立了各自ELISA、胶体金免疫层析试纸条及高效液相色谱-串联质谱检测方法，并组装了ELISA试剂盒，其性能指标均能满足快速、特异、敏感的海产品安全检测要求；以RT-PCR法分别克隆三种毒素单抗的VH和VL基因并用Linker连接获得单链抗体基因（ScFv），再利用重叠延伸PCR（SOE-PCR）法将三种毒素单链抗体基因串联，构建表达载体OA-ScFv-22b、STX-ScFv-22b、TTX-ScFv-22b和OST-22b，原核表达的单链抗体具有与相应毒素反应的活性；表达的融合单链抗体与三种毒素反应活性较弱，以融合单链抗体为基础建立同时筛检三种毒素的免疫学检测方法有待进一步研究。

中文主题词：大田软海绵酸；石房蛤毒素；河豚毒素；检测方法；融合单链抗体

结论摘要：

英文主题词Okadaic acid;　Saxitoxin;　Tetrodotoxin; Detecting methods;　Fuse single-chain antibody

成果综合统计