鹿慢性消耗性疾病(CWD)是潜在的人兽共患病,病原与牛海绵状脑病(BSE)的病原相同,都为朊病毒,具有传染给人类的可能。朊病毒在食物加工过程中不能被灭活,具有食品安全和公共卫生潜在威胁。在发现吉林省疑似梅花鹿海绵状脑病的基础上,本项目对吉林省梅花鹿饲养区进行系统CWD的流行病学调查,对样品进行病理学和免疫学检查,极少数样品HE染色后表现出神经元细胞出现空泡化变化和噬神经现象,而免疫学检测表现出CWD阴性。三年中对吉林省主要养鹿区共七个地区进行了35500头梅花鹿的流行病学调查,采集可疑样品176份,未发现CWD为阳性鹿只病例。本研究扩增梅花鹿朊蛋白核心片段,构建融合两种不同表达标签的重组梅花鹿朊蛋白核心片段His-CWD和Trx-CWD,两种载体在大肠杆菌内高效表达。使用纯化后的重组蛋白免疫动物,建立分泌抗梅花鹿朊蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备了抗梅花鹿朊蛋白多抗血清,均具有较高特异性、亲和力和效价。建立了以单抗和多抗为基础的梅花鹿朊蛋白双抗夹心ELISA检测方法和以单抗为基础梅花鹿朊蛋白Western blot检测方法,能满足快速、特异、敏感的检测要求,该技术已经申报国家专利。
英文主题词Chronic wasting disease(CWD); epidemiology; pathogenic determination; food sfety; sika deer(Cervus Nippon)