以红松未成熟合子胚为外植体,具有成胚差异北美乔松2个细胞系为对照,优化出2,4-D 2.0mg/L+6-BA 1.0mg/L为愈伤组织诱导的最佳植物生长激素组合;含有蔗糖60g/L+ABA 20mg/L成熟胚胎诱导率高达47.5个/克愈伤组织,萌发培养30d时胚胎萌发率为73.3%,3个月后移栽成活率为64.3%,并获得了发育正常的体细胞再生苗木。在GLH成熟培养基中分别添加6%蔗糖、3.16%葡萄糖和3.16%果糖(等摩尔于6%蔗糖,对照),HPLC法分析0、5、10、15、20、25和30d时可溶性糖与蔗糖含量,两者均在第5d达到最高值为24.30和13.70mg/gFW;可溶性蛋白含量却在10d时达到最高值2.334mg/gFW;20d出现分子量约为63.2和31.7KD两种特异蛋白,其中确定31.7KD特异蛋白为储存蛋白。筛选出胚性愈伤组织ET内己糖/蔗糖比率(hexose/sucrose)与ET相对生长率(RGR)之间具有一定正相关性,可以作为评价红松体细胞成熟胚胎发育质量的分子标记。
英文主题词Pinus koraiensis Sieb. et Zucc.;somatic embryogenesis;physiological and biochemical characteristic;cryopreservation