从40多个甘蔗种植区不同甘蔗品种的组织和根系中分离获得500多个可在无氮培养基生长的细菌分离物,利用结合固氮酶活性测定及nifH PCR的高通量固氮菌筛选技术,从中筛选出200多个固氮菌分离物。通过rep-PCR、16S rDNA的RFLP分析以及序列分析技术对这些分离物进行分类鉴定,结合菌株部分生理生化特性,证明这200多个分离物分别属于86个菌株,并将所有菌株最终鉴定为16个属,至少35个种。建立了激光扫描共聚焦显微镜检测GFP标记固氮菌在甘蔗组织内定殖的技术体系,证实了部分菌株的内生性或兼性内生性,并分别用15N示踪法和微量凯氏定氮法对菌株的固氮能力进行了验证。以菌株分泌IAA、分解ACC能力、解磷和铁载体等为指标对菌株的植物益生性能进行筛选,并测定部分菌株的固氮特性,获得了42个固氮能力较强且植物促生性能较佳的固氮菌株,建立了甘蔗促生固氮菌种资源库,为甘蔗生物固氮以及植物促生细菌的研究提供基础和保障。项目还测定了不同施氮水平对甘蔗固氮活性以及甘蔗品种等的影响,并进行了甘蔗耐低氮种质资源筛选,证明甘蔗种质间的耐低氮胁迫能力存在显著差异,获得了一批耐低氮胁迫能力较强甘蔗种质资源。
英文主题词sugarcane; biological nitrogen fixation; microbiological resources; growth promoting effect