应用细胞和基因组织工程学原理和技术,采用动物实验研究的方法,取健康乳猪脐带,分离、培养并鉴定脐带间充质干细胞(UCDS);将内皮细胞生长因子基因(Adv-GFP-VEGF165)质粒转染UCDS创新性的构建VEGF165基因转染的UCDS;缩窄乳猪主肺动脉,限制肺动脉血流,构建肺血少乳猪在体实验动物模型;将培养的UCDS和VEGF165基因转染的UCDS移植于受体乳猪缺血的右肺组织,超声心动图随访研究、组织学及肺血管组织生物化学测定评价肺血少未成熟肺组织结构功能变化,深入研究UCDS和VEGF165基因转染的UCDS对未成熟肺小血管发育的影响,并探讨其可能的作用机制。研究结果对肺血少紫绀性复杂先心病患儿的综合治疗提供一种新的研究思路和治疗策略;对改善患儿愈后,远期疗效,提高生存质量有着更显著的临床意义和社会效益,国内外尚无相关文献报道。
umbilical cord;stem cells;endothelial cell growth factor;pulmonary vascular;development
本研究应用细胞组织工程和基因组织工程学原理和技术,采用动物实验研究的方法,分离、培养并鉴定人脐带间充质干细胞(UCDS);将内皮细胞生长因子基因(Adv-GFP- VEGF165)质粒转染培养的UCDS创新性的构建VEGF165基因转染的UCDS;缩窄乳猪左肺动脉,限制左肺动脉血流,构建单侧肺血少乳猪在体实验动物模型,较圆满的完成了计划的实验内容。本研究作为前期基础研究,成功的构建了单侧肺血少乳猪在体实验动物模型和VEGF165基因转染的UCDS,解决了课题的技术关键问题,研究结果将对课题的深入开展,将培养的UCDS和VEGF165基因转染的UCDS移植于已构建单侧肺血少乳猪缺血的左肺组织,行在体实验动物研究,深入研究UCDS和VEGF165基因转染的UCDS对肺血少未成熟肺小血管发育的影响,并探讨其可能的作用机制,奠定可靠的研究基础和实验条件。本研究成功构建的单侧肺血少乳猪在体实验动物模型,显著的提高了肺血少在体实验动物的存活率,且可进行自身对照研究,提高了在体动物实验研究的准确性,降低了在体动物实验费用,为肺血少先心病的研究提供了较为理想的实验动物模型,国内外尚未见报道。