本项目首次建立了蛇足石杉无菌苗体系,为利用快繁技术开展蛇足石杉大规模栽培以缓解其资源紧缺问题提供了技术手段;筛选到100余株(次)内生真菌菌株,并通过经典形态分类和分子生物学鉴定初步了解了蛇足石杉内生真菌的菌落组成;从内生真菌中筛选出具有石杉碱甲及类似物生成能力的两株内生真菌菌株2F09P03B和LQ2F01,且该两菌株在分类上均属枝顶孢霉属(Acremonium),表明蛇足石杉内生真菌与宿主植物在次生代谢相互关系方面表现出一定的种属专一性;蛇足石杉内生真菌的侵染实验表明,内生真菌能够促进蛇足石杉的生长,并增强其适应环境的能力,其机制具有多样性,菌株2F09P03B与SOD酶活性的增强有关;转录组测序初步研究表明,内生真菌能够通过影响与生物碱代谢相关的天冬氨酸氨基转移酶、酪氨酸氨基转移酶、组氨酸氨基转移酶、伯胺氧化酶等基因的表达促进石杉碱甲及其类似物的生成和积累;另外,其促进宿主植物生长、增强其抗逆性的机制与SOD编码基因和TIR1生长素受体蛋白编码基因的表达有关。本项目获得专利授权1项,参编专著1部,发表论文4篇,培养研究生3名,后续研究已获得国家自然科学基金的继续资助。
英文主题词huperzia serrata; endophytic fungi; RNASeq; tissue culture; huperzine A