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应用携带TC标签的猪瘟病毒研究Npro蛋白核定位分子机制
  • 项目名称:应用携带TC标签的猪瘟病毒研究Npro蛋白核定位分子机制
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 批准号:31201921
  • 申请代码:C180501
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2013-01-01-2015-12-31
  • 项目负责人:李素
  • 依托单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
  • 批准年度:2012
中文摘要:

Npro蛋白是瘟病毒属成员特有的自体蛋白酶,具有拮抗宿主Ⅰ型干扰素产生的功能。此前我们通过猪瘟病毒标记和活细胞成像技术首次发现,Npro蛋白具有核定位现象,但Npro蛋白的核定位分子机制及其生物学功能目前尚不清楚。本项目拟利用插入TC分子标签的猪瘟病毒实时示踪Npro蛋白的入核过程;通过被动扩散、选择性易位试验确定Npro蛋白的入核方式;利用绿色荧光蛋白标记和截短表达界定Npro蛋白的核定位信号;通过 GST pull-down、免疫共沉淀、哺乳动物细胞双杂交、激光共聚焦、RNA干扰等技术筛选和鉴定与Npro蛋白相互作用的细胞核蛋白;通过上调和下调表达研究细胞核蛋白对Npro蛋白核定位、Ⅰ型干扰素应答和猪瘟病毒复制的影响,以及Npro蛋白对细胞核蛋白功能的影响,从而阐明Npro蛋白核定位的分子机制和生物学新功能,为揭示猪瘟病毒复制和致病机制提供科学数据。

结论摘要:

英文主题词classical swine fever virus;Npro protein;nuclear localization;virus-host interaction;interferon


成果综合统计
成果类型
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