中文摘要：

链霉菌是高GC含量革兰氏阳性菌，已报道链霉菌的不同种产生约6000种抗生素和生理活性物质。pSV1是链霉菌中已发现的最大的环型质粒，并含有完整的次甲霉素合成基因簇，但是关于pSV1的复制和调控机制的研究尚处空白。本实验室通过改进操作和检测手段，首次清晰地检测到了pSV1质粒，并找到了其复制相关的基本元件。本项目拟在遗传和生化水平上精细分析pSV1复制和调控的机制，包括鉴定复制基因repL1和调控基因repL2的转录起始，与iteron和NCS序列的结合的特异性和确定精确结合序列，调控蛋白对质粒复制和拷贝数的影响和可能机制等。初步建立RepL2-RepL1-iteron-NCS复制和调控的模型。在此基础上，尝试发展新的可进行大片段DNA克隆的载体。