应用AFLP分子标记技术检测不同化学农药用药水平(施药年限和用药量)下,狼蛛优势种群的基因组DNA的多态性,并与非农区未施药生境下的狼蛛作比较包括两者间多态性片段的显示频率、差异程度和变化趋势;与抗药性相关的多态性位点,查明蜘蛛在遗传上对农药胁迫的响应以及在DNA多态上的变化关系。并以此研究在不同质和量的环境因子(包括海拔、纬度和植被)胁迫下,蜘蛛种群遗传多样性所呈现的差异、遗传漂变强度、遗传分
本研究材料采自云南、内蒙、江西、湖北、湖南、海南、福建等地120多个样点,利用RAPD、AFLP、DNA序列分析(12SrRNA、16SrRNA)等分子标记,同时从生理生化的角度对与有机磷农药相关的关键解毒酶的活性和动力学结果,多角度分析农药、海拔和纬度三因子对狼蛛优势类群(拟水狼蛛、拟环纹豹蛛)DNA多态性和遗传分化影晌的强度及多因子的综合效应。结果表明狼蛛遗传多样性受农药因子的影响大于自然因子(纬度、海拔、温度等)。农药导致低频或O位点上基因型频率增加使得遗传多样性增加。经DNA序列测定,首次发现16SrRNA基因的192~228片段是其农药胁迫的敏感区,A/T碱基对是对农药敏感的碱基对。生理生化测定结果表明蜘蛛体内ACHE、羧酸酯酶、GST、POD四种与解毒代谢相关的酶活性和动力学对农药胁迫表现出不同的响应机制其中ACHE活性在有机磷农药生防田种群中明显降低,其他三种酶均显著高于化防田种群。由此,我们认为两种优势狼蛛的低基因频率保护方式是对蜘蛛长期农药胁迫的一种生态进化策略。本研究通过三年的努力,共撰写论文14篇,已发表8篇,待发表6 篇,培养博士研究生2名,硕士研究生8名。