毛细管电泳(CE)-酶反应器(ER)研究备受关注,然而将磁性微球用于构建CE-ER的报道极少,而且目前的研究仅致力于单酶反应器的研制与应用。为实现酶反应的快速、低成本、高通量分析,本项目拟以磁性微球为酶载体开展CE-多酶反应器(MER)研究利用磁场的可控性,于毛细管不同处施加磁场、用一处磁场固定一种酶/磁性微球,确保酶在空间上的相互独立,从而构建酶反应互不干扰的CE-MER,并将其用于多步生物催化/顺序酶反应分析及酶为靶标的药物筛选等研究。利用物理作用-磁场固定酶/磁性微球,可避免修饰管道表面、制备柱塞以及酶在管道内的固定化等难题,使反应器制作快速、简单化,解决制约MER发展与推广的技术"瓶颈",促进CE-MER技术的发展与应用。此外,磁场消失后酶/磁性微球可被洗脱出毛细管,使酶具有可更新性,克服传统酶反应器寿命短的问题,该优势将进一步增加CE在快速、低成本酶反应分析和药物筛选中的应用。
Enrichment;extraction;complex samples;capillary electrophoresis;
在本研究基金资助下,我们主要致力于复杂样品中痕量组分的分离测定,以拓宽毛细管电泳的应用范围。本课题将各种富集、萃取新技术与毛细管电泳联用,建立了一系列快速测定中草药、尿样、血清、牛奶等复杂样品中苦参碱、氧化苦参碱、5-磺基水杨酸、麻黄碱、伪麻黄碱和磺胺二甲嘧啶的新方法。同时,利用中空纤维—液液液萃取结合毛细管电泳,我们还实现了水和鱼肉样品中汞的形态分析。本课题所建立的方法由于萃取后不仅去除了基体中的大部分干扰,同时还弥补了毛细管电泳因为进样量少和检测池比较短而造成的灵敏度不高的缺陷,具有良好的选择性和足够的灵敏度(比传统方法相比,灵敏度可以提高2-3个数量级)。