中文摘要：

汉坦病毒感染性疾病仍在世界范围内肆虐流行，我国为重疫区。了解其发病机理的关键环节是病毒如何入侵细胞。汉坦病毒的受体目前还未彻底阐明，阻断已发现的受体并不能完全阻断病毒感染。本课题拟采用研究蛋白质相互作用的新技术分离鉴定汉坦病毒包膜糖蛋白的受体或受体辅助分子，其目的是为探索汉坦病毒的致病机理、制定预防和治疗措施开辟新途径。本研究首先在体外表达汉滩病毒标准株76-118结构功能完整的包膜糖蛋白，用免疫

结论摘要：

将汉坦病毒（HV）包膜糖蛋白G2膜外区各功能片段的真核表达质粒转染HEK293细胞，仅N端81-140（G2N81-140）氨基酸片段在胞浆中有大量表达。将其与β3整合素各功能片段真核表达质粒分别成对共转染细胞，免疫共沉淀验证两者的相互作用。将原核表达的G2N81-140片段纯化后与β3整合素功能片段孵育,GST pull-down验证它们之间的相互作用，结果表明G2与β3整合素可能存在着直接的相互作用，且作用位点位于G2 N端81-140与β3整合素23-133位氨基酸之间。用生物素标记HV易感细胞VERO E6细胞膜蛋白，将纯化的原核表达G2N81-140片段作为探针与生物素标记细胞膜裂解液进行孵育，通过GST pull-down分离与G2蛋白相互作用的细胞膜蛋白，结果显示一个约30KDa的细胞膜蛋白与G2N81-140氨基酸片段之间存在着特异性相互作用，表明该30KDa蛋白可能是HV细胞膜候选受体或受体辅助分子之一。本课题的研究结果为β3整合素作为HV特异性细胞膜受体提供了有力的证据，同时也表明除β3整合素外HV入侵细胞还存在有其它候选受体或辅助受体分子。