中文摘要：

本研究拟通过对比不同发育阶段胚鼠脑组织正常及缺氧后Wnts、β-catenin、BDNFmRNA转录及表达水平的改变，探讨缺氧环境下Wnt信号及BDNF信号的改变；体外培养神经元，构建稳定表达β－catenin的病毒载体，转染培养的胚脑神经元，同时用RNA干扰技术阻断培养神经元中β-catenin的表达，对比两者在正常及缺氧情况下细胞活性、细胞周期、神经元分化、神经元凋亡及突触形成长短方面的改变，以期阐明Wnt信号在缺氧性脑损伤中的作用及可能的机制；探讨改变β-catenin表达以及阻断Wnt信号通路中钙、CamKⅡ、PKC传导后对BDNFmRNA转录及表达水平的影响，阐明Wnt对BDNF信号的调节作用以及两者串话的交汇点，以期寻找一种全新的发育期脑损伤的干预手段。

结论摘要：

1.短暂钳夹子宫动脉建立宫内缺氧缺血脑损伤(HIBD)模型，使用无糖低氧(oxygen/glucose deprivation，OGD)建立体外缺氧缺血模型。分别采用形态学及生化指标鉴定HIBD及OGD模型。 2.研究缺血缺氧损伤中Wnt信号途径的改变，探索Wnt信号系统与神经元缺血缺氧损伤的关系。结果表明，缺血缺氧对β-catenin及GSK-3βmRNA表达无影响，但可使GSK-3β及P-β-catenin蛋白表达增强。 3.构建表达β-catenin的慢病毒载体，转染体外培养的皮质神经元，对比表达β-catenin组与正常对照组神经元在细胞活性方面的差别。LDH结果表明，增强β-catenin表达后神经元对缺氧的耐受能力有一定程度的提高。 4.研究BDNF与Wnt信号通路之间有无串话可能。加入外源性BDNF后检测β-catenin及GSK-3β的表达。结果表明，加入BDNF后，β-catenin表达无改变，GSK－3β的表达减弱，我们的实验表明目前尚无充分的证据证明BDNF与Wnt信号通路之间有串话现象。