由于单纯疱疹病毒Ⅱ型感染易传播,有多种感染形式,如亚临床感染、潜伏感染和复发感染等。其感染大多以潜伏状态在人体终生存在,极易引起复发,给人类造成极大的危害。特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)在诱导特异性细胞免疫,消除细胞内病毒慢性潜伏感染中起到重要作用。本课题拟构建携带CpG免疫刺激序列,同时能够表达特异识别HSV-2 gB糖蛋白的CTL表位和gD糖蛋白基因的重组真核质粒,观察其诱导的特异性CTL应答以及抗病毒感染的免疫保护效应。为预防和治疗HSV-2的慢性复发感染奠定可靠的物质基础。
生殖器疱疹(GH)主要由单纯疱疹病毒II型(HSV-2)感染所致。该病易复发,目前尚无彻底治愈的方法,且发病率逐年上升。研制有效的生殖器疱疹病毒疫苗,是预防和治疗单纯疱疹病毒II型(HSV-2)感染的关键。近年来,新型的DNA疫苗由于能诱导出较好的细胞免疫和体液免疫而日益受到重视。本研究针对II型单纯疱疹病毒(HSV-2)包膜糖蛋白gD以及包膜糖蛋白gB的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位,构建重组真核表达质粒pVAX-gD-CTL。研究重组质粒pVAX-gD-CTL在COS-7细胞中的表达,评价其激发动物产生免疫反应。结果显示pVAX-gD-CTL可诱导小鼠产生高滴度gD IgG;可刺激机体产生INF-γ;MTT法检测脾淋巴细胞增殖结果显示pVAX-gD-CTL具有一定的刺激脾淋巴细胞增殖能力;CD4+、CD8+ T细胞亚群分析结果显示,该重组质粒可以刺激小鼠机体CD4+T与CD8+ T细胞数量均升高。我们构建的HSV-2重组DNA疫苗对体液免疫和细胞免疫均有增强作用,是一种很有希望的生殖器疱疹DNA疫苗,具有良好的临床应用开发前景。