本项目以基因疫苗、SSH和RNAi为研究的技术平台,从细胞和分子水平研究卵透明带蛋白(ZP)不同抗原表位免疫抗受精机理,试图通过构建大鼠(或小鼠)不同ZP抗原表位基因疫苗,比较不同ZP抗原抗受精的作用;检测免疫前后卵泡发生、卵巢发育相关因子的基因表达差异和动态变化;筛选不同ZP抗原免疫前后卵泡、卵巢发育相关因子的差异表达基因;从mRNA水平了解最有意义的、新发现相关基因表达的时空秩序及与动物卵泡和卵巢的发育相互关系,通过将目的基因转染到真核细胞取得稳定转染株后来研究其靶蛋白活性及在细胞中的功能。以期深入了解卵透明带蛋白不同抗原表位免疫抗受精机理及相关参与因子在ZP蛋白免疫抗受精过程中的作用及其分子机制;ZP疫苗引起的卵泡和卵巢的发育受损伤的机理。为发展拥有自主知识产权的免疫控制鼠类等有害动物、人口控制新型避孕手段提供知识基础。
本项目以基因疫苗、SSH和RNAi为研究的技术平台,从细胞和分子水平研究了卵透明带蛋白(ZP)不同抗原表位免疫抗受精机理。研究发现,ZPC碳末端的序列是参与精卵结合的功能表位;除ZP基元外,其它ZPC序列具有免疫原性;brZPCp疫苗接种鼠后,能够激起特异性抗体,抗体可以精确的与ZPC结合,生育力于对照相比下降了45%,接种brZPCp对鼠的卵巢结构没有损伤;以ZPC全长或部分片段作为抗原接种动物后,可以诱导特异性的抗体产生,但其免疫原性和在生育上的作用是不同的;其中,包含外显子5-8的片段,其免疫原性较强,而且抗生育效果明显,对动物卵巢安全。ZP基元(exons 3-6)免疫原性较差,而且对生育没有明显的影响。本研究为深入了解卵透明带蛋白不同抗原表位免疫抗受精机理及相关参与因子在ZP蛋白免疫抗受精过程中的作用及其分子机制,阐明ZP疫苗引起的卵泡和卵巢的发育受损伤的机理,为发展拥有自主知识产权的免疫控制鼠类等有害动物、人口控制新型避孕手段提供知识基础。