中文摘要：

骨肉瘤是骨科最主要的原发恶性肿瘤，致残致死率高，但其发生机制尚不清楚，仍缺乏特异性治疗靶点及靶向药物。以大规模的临床标本为基础，结合分子或细胞层面上的分子信号转导研究，阐明骨肉瘤发生发展的分子信号转导机制并寻找新的治疗靶点，这对实现骨肉瘤的靶向治疗非常重要。具有抑癌基因功能的Hippo/MST1信号通路是近年的研究热点，可抑制其终靶点Yki/YAP2所介导的基因表达，从而抑制细胞的增殖。YAP2作为原癌基因在大量肿瘤上发现过表达和激活，但在骨肿瘤中的功能和机制未见报道。我们在前期工作中发现，YAP2在骨肉瘤细胞系和临床骨肉瘤标本中存在异常。在此基础上，我们拟建立骨肉瘤组织库大量收集临床标本，结合细胞和动物模型，采用细胞生物学技术和信号转导研究手段，阐明YAP2在骨肉瘤发生、发展中的作用和机制，寻找YAP2在骨肉瘤中的下游调控基因，发现新的特异性治疗靶点，为临床骨肉瘤的诊疗提供理论基础。

结论摘要：

骨肉瘤是骨科最主要的原发恶性肿瘤，致残致死率高，但其发生机制尚不清楚，仍缺乏特异性治疗靶点及靶向药物。我们研究了Hippo/YAP信号通路在骨肉瘤增殖和骨肉瘤耐药性中的作用。发现原癌基因YAP促进骨肉瘤细胞U2OS和MG63的细胞增殖，并增加骨肉瘤细胞的耐药性。分子水平上我们检测到原癌基因YAP在U2OS细胞中下调丙酮酸脱氢酶激酶PDK4的表达，上调miR-21的表达。使用骨肉瘤常用的化疗药物DOX和MTX 处理骨肉瘤细胞U2OS和MG63，发现DOX和MTX都能降低Hippo信号通路上游MST1和LATS1/2的蛋白量，降低YAP和14-3-3的结合并引起YAP的入核和激活。我们的结果证明Hippo/YAP信号通路参与骨肉瘤的发生和耐药性，YAP可以做为潜在的骨肉瘤治疗的靶点。