中文摘要：

整合素aIIb/b3相关的双向信号传递在血小板的活化过程中起关键作用。将合成的整合素b3胞浆段多肽（TNITYRGT、TNITY和RGT）引入化学修饰使其获得细胞膜穿透性，观察其对正常人血小板以及稳定表达人类血小板糖蛋白Ib/IX和整合素aIIb/b3的CHO细胞（123细胞）双向信号传递的影响。另将对应于下列各肽段的cDNA各自连接于无胞浆片段的IL-2RcDNA之后，构建表达载体并稳定表达于123细胞。各种肽段包括完整的整合素b3胞浆段、分别终止于F754和Y759以及去除TNITY的整合素b3胞浆段截短变异体、TNITYRGT、TNITY和RGT。观察上述细胞株结合可溶性纤维蛋白原的能力以及在固相化纤维蛋白原上粘附和伸展的差别。本研究的目的在于了解一、整合素b3胞浆段C末端序列是否参与正常人血小板活化的双向信号传递；二、上述序列参与双向信号传递的模式和机制。

结论摘要：

血小板整合素主要通过β亚单位胞质区与信号分子间相互作用来调节信号转导，其中蛋白激酶Src因其在血小板功能中的关键作用而备受关注。我们的研究发现，十四烷酰化的RGT肽（myr-RGT，对应于整合素β3胞浆末端序列）抑制人类血小板在固相化纤维蛋白原上的粘附和伸展以及纤维蛋白凝块回缩和血小板二相聚集；但不影响可溶性纤维蛋白原结合。同时，RGT肽可分离整合素β3上结合的Src并抑制整合素β3和Src重组蛋白的相互作用。此外，myr-RGT肽抑制整合素β3的Y747和Y759的磷酸化。由此证明，myr-RGT肽通过破坏Src与整合素β3的结合而选择性地抑制整合素αIIbβ3外向内信号转导。此外，我们在表达整合素αIIbβ3的CHO细胞株中表达上述截短变异体各自连接于无胞浆片段IL-2R的跨膜融合蛋白观察其显性阴性作用。结果证实，整合素β3胞浆段末端序列TNITYRGT和RGT序列分别通过与胞浆中相应信号分子的相互作用而非构型改变在CHO细胞信号转导中起作用。本研究有助于深入了解整合素β3胞质区与胞内组分间相互作用的分子基础，同时RGT肽的功能对新型抗血栓制剂的发展具有重要意义。