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肝细胞固相色谱法的建立及茵陈蒿汤效应物质基础研究
  • 项目名称:肝细胞固相色谱法的建立及茵陈蒿汤效应物质基础研究
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 批准号:30300446
  • 申请代码:H2803
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:洪敏
  • 负责人职称:研究员
  • 依托单位:南京中医药大学
  • 批准年度:2003
中文摘要:

拟构建肝细胞固相色谱法,模拟生理或病理状态下药物在体内进行生物活性表达的一些关键步骤,追踪中药有效方剂中的效应物质。以分析茵陈蒿汤这一实例入手,分析茵陈蒿汤效应物质基础,论证方法的科学性及干扰因素、最适条件、适用范围等。肝细胞固相色谱法力求克服以往成分分离与效应筛选脱节的弊端,使效应成分的分离与筛选结合在一起,进而探讨药物的作用机理,是化学成分-效应-作用机理联动的一种药物研究方法,尤其适合于天然药物效应物质基础的研究。该项研究构建的肝细胞固相色谱方法,将为治疗肝病的中药乃至整个中药的效应物质基础的研究提供新的思路和方法。

结论摘要:

本课题建立的肝细胞固相色谱法,创造性的应用活细胞选择性地结合中药提取液中的活性成分。首先应用阳性药物证实其与肝细胞结合并可被检测,证实了方法的可行性。在此基础上对茵陈蒿汤的组成药物的效应成分进行研究,在茵陈蒿中得到5个与肝细胞结合的成分,鉴定3个;在栀子中得到2个与肝细胞结合成分,鉴定1个。对这些成分的初步药效实验及文献支持表明多数成分有保护肝细胞作用。由于肝细胞上有多种受体,能够特异地、选择性地与活性成分结合,适合中药作用多靶点活性成分筛选的特点。研究中考察了方法中的给药浓度、肝细胞预培养时间、洗涤次数、药物与肝细胞结合时间,选择了文中所用的最佳条件,在此条件下,使肝细胞活性保持良好,既排除了非特异性结合成分,又可体现出各效应成分与肝细胞受体结合的特异性。本课题研究结果表明肝细胞固相色谱法可以做为筛选保肝药物尤其是中药复杂体系中效应成分的方法,并且通过解离液成分的分析,有发现药物作用后效应因子的可能性。因此本项研究成功的建立了肝细胞固相色谱法寻找中药效应成分的平台,为分析中药复杂体系中的效应成分提供了新的、特异性的方法和思路。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
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