中文摘要：

松脂醇二葡萄糖苷（简称PDG）是具有抗癌、降血压、预防骨质疏松等多种功能的天然产物，存在于少数药食同源性植物中，微生物合成PDG对其高效获得与加工利用有重要的实际意义。申请人前期发现了一株高产PDG（可达4 g/L）的拟茎点霉，揭示了微生物PDG合成途径及其关键性糖基化酶的存在。项目以此菌为材料，通过硫酸铵沉淀、柱层析、凝胶过滤和AKTA FPLC对参与PDG合成的糖基化酶进行分离纯化，分析其末端氨基酸序列，设计简并引物；在构建RACE cDNA文库的基础上，通过PCR扩增和RACE技术获取该酶的全长基因，并对其进行克隆和真核表达；分离纯化表达产物，研究其酶学特性，分析其在PDG合成途径中的作用底物、产物及反应机制，探索该菌的PDG合成途径。项目实施可为该菌中PDG合成途径的全面研究奠定基础，为微生物合成PDG的代谢工程改造提供理论依据，为其它微生物中PDG合成途径研究提供参考。