中文摘要：

通过前一项国家自然科学基金课题(30100006)的研究，我们发现登革2型病毒衣壳蛋白(D2C)-葡萄球菌核酸酶(SN)融合蛋白在体外具有显著的抗病毒活性.本研究在此基础上，通过建立稳定表达融合蛋白TAT-D2C-SN的CHO工程细胞系，利用TAT蛋白转导域将重组蛋白D2C-SN导入细胞／体内，分别在细胞水平和动物水平观察其抗病毒活性及毒性，探讨TAT介导的D2C-SN融合蛋白作为抗病毒蛋白药物的

结论摘要：

登革病毒感染导致的登革热和登革出血热严重威胁着全球近半数人的健康。目前，尚无安全有效的疫苗和药物用于抗登革病毒感染。最近我们发现，衣壳蛋白靶向灭活策略在抗登革病毒感染领域具有一定的潜力，登革2 型病毒衣壳蛋白(D2C)-葡萄球菌核酸酶(SN)融合蛋白能够在病毒增殖过程中装配入颗粒内部，从而抑制病毒的增殖。本研究中，我们结合蛋白转导域技术，在大肠杆菌中对融合蛋白TAT-D2C-SN进行了重组表达 ，表达的融合蛋白分子量大小约为33KD,能够为抗D2C单克隆抗体和抗SN血清识别。同时，通过抗生素筛选，我们建立了稳定分泌表达TAT融合蛋白的哺乳动物细胞系，表达的TAT融合蛋白对哺乳动物细胞没有明显的毒性，同时具有良好的蛋白转导活性，能够将融合蛋白非特异地导入细胞内部。并进一步筛选获得了稳定分泌表达融合蛋白TAT-D2C-SN的真核细胞系，表达的重组蛋白具有良好的蛋白转导活性，能够进入Vero和C6/36细胞内部。上述结果为深入探讨TAT -D2C-SN 融合蛋白作为抗病毒蛋白药物的可能性奠定了基础。