中文摘要：

核苷类药物在抗病毒、抗肿瘤治疗等方面有广泛应用。该类药物在体内都存在细胞内磷酸化活化的过程，其临床疗效及严重毒副作用大都与细胞内磷酸化后的活性成分浓度相关。然而，当前的核苷类药物药动学研究结果多基于血样内的无活性成分，或仅在个体水平上对磷酸化成分浓度变化进行简单、表浅的比较分析，忽视了核苷类药物细胞内磷酸化过程的复杂性及其对药物作用强度的重要影响。可见，对核苷类药物细胞内磷酸化动力学过程进行重点考察，对临床上安全合理使用该类药物有重要意义。为此，本项目选择齐多夫定在犬外周血单核细胞内的磷酸化、恩替卡韦在大鼠肝细胞内的磷酸化过程为研究模型，以药物在效应细胞内磷酸化物浓度变化为动力学研究对象，将传统的药动学公式和理论等，延伸到更为微观和直接的细胞层面。本项目将建立核苷类药物细胞内磷酸化的动力学模型，并以此来揭示原形药物药动学与磷酸化活性成分药动学间的关联性。

结论摘要：

核苷类药物在抗病毒、抗肿瘤治疗等方面有广泛应用。该类药物在体内都存在细胞内磷酸化活化的过程，其临床疗效及严重毒副作用大都与细胞内磷酸化后的活性成分浓度相关。本研究主要着重于齐多夫定、恩替卡韦在体外细胞培养体系和体内效应组织细胞内的磷酸化过程的动力学研究。结果发现，齐多夫定在体外细胞培养体系和人外周血单核细胞内均发生磷酸化，生成齐多夫定一、二、三磷酸化物，其中一磷酸化物是主要的磷酸化产物。血浆内齐多夫定原药的半衰期时间较短，而细胞内各磷酸化物的半衰期较长，通过实验数据证明了现有血药药动学数据的不足。本研究首次建立了恩替卡韦磷酸化在HepG2细胞及肝组织匀浆样本内的LC-MS/MS测定方法，并对其生物样本的稳定性进行了考察。恩替卡韦在HepG2细胞培养体系中可发生磷酸化反应，同时生成恩替卡韦一、二、三磷酸化物，且各磷酸化物的蓄积量在一定范围内与细胞外药物浓度呈正相关。恩替卡韦在大鼠肝组织内的磷酸化产物与其在体外细胞实验中的产物一致，且磷酸化物的半衰期较原药稍短。原药与各磷酸化物的药物暴露参数相关性研究结果显示，齐多夫定、恩替卡韦原药的药物暴露参数与其效应组织细胞内的活性磷酸化物相关性良好，故本研究可实现通过原形药物浓度预测各磷酸化物在效应细胞内的暴露情况，从而推断药物的治疗效应。本研究共发表科技论文7篇，被录用1篇，其中SCI收录4篇，CSCD收录2篇，同时获得实用新型专利一项。另外向SCI源期刊投寄论文3篇。