中文摘要：

炎性反应在急性肺损伤发病机制中发挥重要作用，核转录因子NF-kB对炎症因子的起重要调控作用。应用对应激反应敏感的热休克蛋白70启动子（HSP70）和缺氧反应元件（HRE）驱动具有抑制NFκB作用的NF-IkB表达，以发挥抑制炎症反应减轻LPS诱发的肺损伤。从大鼠肝脏提取基因组DNA，PCR扩增HSP70基因调控序列，构建pGL3-HSP重组质粒，酶切鉴定和筛选活性强的重组HSP70启动子真核表达载体后，构建HSP70启动子驱动NF-κB P65反义RNA和IkB表达质粒。经DNA测序，表明成功地构建了HSP70/HRE/NF-κB P65反义RNA和HSP70/HRE/IkB 表达载体，荧光素酶检测表明该表达载体的启动子活性在LPS和热刺激下增强约2倍；HER能够增强HSP70启动子的活性。RT-PCR和Western检测显示在LPS刺激下HSP70/HRE/IkB 表达载体能够明显抑制NFκB活化，表现为细胞核中磷酸化NFkB含量减少；而HSP70/HRE/NF-κB P65反义RNA表达载体的作用较弱。HSP70/HRE/IkB 表达载体抑制LPS导致小鼠肺损伤的实验需要进一研究。