氟中毒的广泛性与危害性越来越引起人们的密切关注,氟的生殖毒性也得到了肯定。大量实验证实氟可导致动物精子活力和超激活运动显著降低,而高水平的精子活动力对于正常受精至关重要。本课题组前期对氟中毒小鼠精子进行了全基因组表达谱芯片分析,结果发现诸多与ATP生成相关的基因发生改变。因此,本项目着重对精子动力来源-ATP展开研究,通过建立不同剂量氟暴露动物模型,及精子无氧酵解和有氧呼吸模型,应用电镜技术、显微录像与化学发光法、线粒体呼吸功能测定仪、PCR-SSCP与PCR-DS、荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术等,分别检测精子超微结构、ATP生成途径、精子线粒体呼吸状态,以及ATP代谢关键分子在DNA、RNA和蛋白质水平上的变化,综合分析氟对精子ATP的影响及分子损伤机理,以探求氟致精子活动力降低的动力依据,进一步阐明氟的精子毒性机制,从而为实施科学诊断和靶标药物设计提供依据。
英文主题词Fluoride;Sperm;ATP;Mitochondrial respiration;Mitochondria