金鱼Tgf2转座酶的结构域鉴定及其转座机制研究-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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金鱼Tgf2转座酶的结构域鉴定及其转座机制研究

项目名称：金鱼Tgf2转座酶的结构域鉴定及其转座机制研究
项目类别：青年科学基金项目
批准号：31201760
申请代码：C040601
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2013-01-01-2015-12-31

项目负责人：蒋霞云
依托单位：上海海洋大学
批准年度：2012

中文摘要：

DNA转座子(Transposon)可在基因组中进行高效转座，基于转座子的插入诱变策略，在鱼类重要性状主控基因的筛选、功能解释方面具有重要的研究前景。本项目拟在近年我们发现的一个新的、具有自主转座活性的脊椎动物hAT超家族转座子，即金鱼Tgf2转座子基础上，从其编码的3种不同区域缺失的转座酶入手，进行转座酶介导Tgf2转座子供体质粒的体外DNA剪切活性和斑马鱼体内切离-整合活性研究，确定金鱼Tgf2转座酶的活性形式；以生物信息学方法预测出转座酶DNA结合区、催化区等必需结构域，进行特定基因结构域区域分离，并原核表达获得独立结构域多肽；通过DNAase足迹法、分子筛层析谱图、体外DNA切离酶活测定等方法，鉴定出转座酶关键结构域的功能及排布，探索其可能作用机制。本研究旨在阐明金鱼Tgf2转座酶的关键结构域组成，以期改造、并获得更优的转座酶，为养殖鱼类重要性状主控基因插入诱变库的建立奠定基础。

中文主题词：金鱼；转座酶；Tgf2；锌指结构；原核表达

结论摘要：

英文主题词Goldfidh；Transposase；Tgf2；Znc finger；Prokaryotic expression

成果综合统计