供体核的重编程效率低下是克隆猪和转基因猪生产过程中的瓶颈与难点。由于核移植技术的缺陷,在众多影响重编程效率的因素中,卵母细胞核因子的重编程作用长期被忽视。卵母细胞核因子可能在重编程过程中发挥关键作用。本研究将整合有Oct4启动子-EGFP报告载体的成纤维细胞核导入未去核的MⅡ期卵母细胞,构建了Oct4-EGFP四倍体胚胎,将母源因子、核因子及转录因子三种重编程因子结合到一种方法中;另外,使用去除生发泡的GV期卵母细胞提取物处理成纤维细胞。通过上述方法,探讨以Brg1为代表的卵母细胞核因子对供体细胞基因组上Oct4的表达影响及核因子对胚胎发育的影响;阐明MⅡ期卵母细胞核因子及发育后期胚胎中的卵母细胞核因子是否具有重编程作用,同时,阐明GV期卵母细胞核因子对成纤维细胞是否有重编程作用。本研究从卵母细胞核因子的角度探讨体细胞核移植过程中的重编程机制问题,可为提高猪体细胞克隆的效率提供科学依据。
英文主题词Porcine;nuclear factors;somatic cell nuclear transfer;;