中文摘要：

儿童骨髓增生异常综合征（MDS）是克隆性造血干细胞疾病，治疗困难，预后较差。NK细胞作为固有免疫的重要组成部分，在防止和限制恶性细胞以及各种感染中起重要作用。研究证实MDS患者体内的NK细胞功能下降，亦证实部分患者体内NK细胞也存在异常克隆，所以测定MDS患儿体内异常克隆来源NK细胞功能及探讨其机制对于最终阐明NK细胞功能降低的原因是十分关键的一步。本课题研究儿童MDS外周血异常克隆来源NK细胞数量、杀伤功能以及表面受体的表达，旨在分析异常克隆在NK细胞功能异常中发挥的作用并初步探讨其机制。课题将阐明是否异常克隆来源的NK细胞参与了儿童MDS患者NK细胞功能降低这个问题，为在化学治疗以及骨髓移植之外寻找逆转MDS患者NK细胞功能、防止疾病进展的治疗方法提供理论依据；为目前广泛使用的免疫抑制治疗MDS提供理论依据；也为对MDS使用免疫治疗提供理论依据。

结论摘要：

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组累及一系或多系血细胞的异质性克隆性造血干细胞疾病，其共同特征为骨髓衰竭以及高风险向白血病转化。骨髓增生异常综合征的确切发病机制目前尚不清楚，许多资料都提示NK细胞也许参与了MDS异常克隆的监视、防止MDS进展及转化为急性粒细胞白血病。一般认为，MDS异常克隆起源于多向祖细胞或其以上的干细胞。Miura等使用流式细胞术与FISH检测-7患者，发现骨髓中B淋巴系组细胞，T/NK淋巴系祖细胞均有异常克隆。一些研究也证实MDS患者体内NK细胞数量正常，但是杀伤K562细胞功能降低。以上研究结果提示MDS患者受损的NK细胞功能是NK细胞表面受体低表达以及下调的细胞内信号所致，但到目前为止NK细胞功能下降的确切机制仍然不清楚。关于儿童MDS患者NK细胞数量、功能的资料很少见，所以分析MDS患儿体内NK细胞数量、功能、表面受体表达、检测NK细胞是否有异常克隆是阐明为何儿童MDS患者体内NK细胞功能下降的重要步骤。二、结果及说明 1、共对34例儿童MDS及66例儿童AA外周血进行8色流式细胞术测定，结果提示MDS患儿的淋巴细胞比例与再障患儿无差异，但NK细胞比例明显低于再障患儿及正常对照。 2、MDS患者各亚群中nkp30表达与正常对照及AA无明显差异。MDS患者各亚群中NKG2D表达与正常对照无差异，与AA亦无明显差异。MDS患者各亚群中nkp44表达在CD3-CD56+以及CD3-CD56dim中明显低于AA及对照。MDS患者各亚群中nkp46表达与正常对照及AA亦无明显差异。MDS患者各亚群中CD94表达在CD3-CD56str中明显低于AA，其余亚群中与正常对照及AA无明显差异。 3、使用流式细胞术检测与K562细胞共孵育后的CD107a表达来检测NK功能。MDS组明显低于AA组及对照。 4、共对6例具有染色体核型异常的MDS患儿进行FISH检测，未在NK细胞中检出异常克隆；一共对8例女性MDS患儿进行HUMARA检测克隆性，未发现克隆性NK细胞存在。三、结论儿童MDS患者NK细胞计数及功能低于正常及AA患者。儿童MDS自然杀伤受体（NCR）的表达降低,儿童MDS患者CD3-CD56str中CD94表达明显降低。未从儿童MDS患者外周血的NK细胞中发现异常克隆。