在可注射骨组织工程中,微支架不但容易使细胞分布均匀、保持细胞之间的紧密联系,还能增强水凝胶的强度,防止细胞的游走和细胞外基质的坍塌。而采用KRSR改性水凝胶,可以使其仅与成骨细胞发生特异性结合,更有利于骨形成。基于此,本项目首先采用三种方法构建了壳聚糖微球(直径350~720μm),然后在仿生体液中沉积磷灰石涂层形成微支架,再制备经KRSR序列接枝改性的海藻酸钠水凝胶,最后对以上材料进行理化性能和生物学性能测试。结果发现经凝聚沉淀+京尼平交联法制备的壳聚糖微球溶胀率低、降解慢;仿生沉积钙磷涂层后微球密度增大、硬度增加,MC3T3-E1细胞贴附好、增殖快、分化程度高。核磁共振检测显示FGGKRSR肽链已经接枝到海藻酸钠分子上;BCA试剂盒检测显示肽链接枝量为1152μg肽/0.01g;细胞接种4h后有较好伸展,24h时皱缩、凋亡。细胞毒性试验显示细胞无法在海藻酸钠溶液中存活。结论凝聚沉淀+京尼平交联法制备的壳聚糖微球具有良好的理化性能,仿生沉积钙磷涂层能促进MC3T3-E1细胞的增殖和分化,可以将FGGKRSR肽链接枝到海藻酸钠分子上,但需要更换海藻酸钠材料重新进行实验。
英文主题词CaP coating; Chitosan; Microscaffold; Sodium alginate hydrogel; Bone tissue engineering