本课题拟用地黄饮子含药脑脊液作用于β淀粉蛋白( Amyloidβ- protein, Aβ)损伤的体外培养PC12细胞系,观察细胞生存活力、细胞膜结构变化、氧化自由基损伤、钙离子内流和细胞凋亡的调控情况同时结合药物蛋白质组学方法,比较分析空白组、模型组、中药治疗组蛋白质组图谱,找出差异表达的蛋白质。力图排除体内实验的干扰因素,寻找地黄饮子防治老年性痴呆(Alzheimer's disease AD
本课题观察地黄饮子含药脑脊液作用于β淀粉蛋白25-35 ( Amyloidβ- protein, Aβ25-35)损伤的体外培养PC12细胞,结果显示地黄饮子脑脊液能有效改善Aβ损伤后的PC12细胞生存状态,提高细胞生存活力。地黄饮子能明显降低PC12细胞受Aβ刺激时即早基因c-fos和c-jun的过度反应,提高PC12细胞对外界不良刺激的应激性。地黄饮子能提高培养液中SOD、CAT和GSH-Px等抗氧化酶活性,提高对自由基清除能力。地黄饮子能有效抑制Aβ损伤所致的钙超载现象,保护细胞膜结构。地黄饮子是通过调控bcl-2/bax的比值、降低caspase-3基因mRNA的表达来抑制Aβ损伤PC12细胞的过度凋亡。同时本课题在国内首次应用药物蛋白质组学的技术观察地黄饮子对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的干预作用,分析比较在药物作用后,模型组、中药治疗组蛋白质组图谱,找出差异表达的蛋白质,进一步客观、精确的评价地黄饮子的疗效。课题系统的阐述地黄饮子防治老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)的作用机理,为AD的新药研究提供了理论基础。