利用现有INH基因疫苗pCIS和asd+/asd- - 减毒沙门氏菌载体-宿主平衡系统,构建不含抗性基因的INH真核和原核表达质粒沙门氏菌载体疫苗。将真核质粒转染入卵巢颗粒细胞或将原核质粒表达产物与卵巢颗粒细胞进行共培养,结果表明表达产物具有抑制素的免疫学活性和生物学活性。将疫苗连续传接50代后质粒仍稳定存在,且表达的蛋白具有免疫原性,减毒菌并没有发生毒力返强,从而确定了疫苗的稳定性。疫苗免疫小鼠后无异常临床表现,机体不存在急性、慢性以及生殖等方面毒性作用,因此确定疫苗的安全性。INH真核疫苗免疫小鼠后均可诱导Th2型为主的免疫反应,以1010CFU/200ul的剂量仅免疫一次后的肌注免疫比口服免疫能更有效提高优势卵泡个数,并提高其产仔数。INH原核疫苗的研究结果表明INH原核疫苗口服免疫昆明小鼠,试验组均产生较高IgG抗体,以109CFU/200ul剂量免疫三次后小鼠产仔数最高。本项目成功构建两种抑制素平衡致死系统,有效降低了生产成本,简化使用程序,建立更安全有效提高动物繁殖力的新技术平台。另外,构建含GFP基因的无抗性抑制素真核质粒,探讨抑制素在颗粒细胞中的作用机制。
英文主题词inhibin; chromosome-plasmid balanced-lethal system; gene immunization; immune mechanism; safety