链霉菌702所产抗真菌活性物质对多种霉菌有强抑制作用,尤其对水稻纹枯病菌的抑制作用优于井岗霉素,但其结构式并不清楚。本研究通过柱层析从链霉菌702发酵液粗提液中初步分离出抗真菌活性物质,再利用HPLC制备纯度为99%的抗真菌单体化合物,并通过对此单体化合物进行理化性质的研究,以及紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振谱对此抗真菌组分进行科学解析,推断出该物质的化学结构及分子量。结果对实现农业可持续发展,开发具有自主知识产权的抗真菌生物防腐剂或杀菌剂在理论和实践应用上均有重要意义。
Streptomyces padanus JAU4234;polyene macrolide antibiotics;structure identification;antifungalmycin 702;fungichromin
发现并鉴定两种新型多烯大环内酯抗生素--抗真菌霉素702和制霉色基素。链霉菌702菌株在500L全自动不锈钢发酵罐中进行发酵,发酵液经溶媒萃取和柱层析分离纯化获得纯度达90%的抗真菌活性物质农抗702。农抗702经制备型HPLC进一步分离,获得光谱纯达99%的抗真菌活性物质的两个单体组分DZP8和DZP9。依据两单体组分的理化特性和波谱学检测数据进行科学解析和推导,分别进行了化学结构鉴定,单体组分DZP8的分子式和分子量分别为C35H60O14和704Da,单体组分DZP9的分子式和分子量分别为C35H58O12和670Da,均为多烯大环内酯抗生素。通过美国化学学会的SciFinder从CAS已发表的4000多万种化合物中检索其结构式发现,DZP9与2003年报道的制霉色基素(fungichromin)同质,但DZP8未见报道,为国内外首次发现和鉴定,命名为抗真菌霉素702(antifungalmycin 702 )。链霉菌702在500L全自动发酵罐中进行免蒸生料发酵工艺研究。分别探索到免蒸生料分批不补料与分批补料发酵工艺流程。免蒸生料发酵比常规蒸汽消毒灭菌发酵节省能耗30%以上。这是抗生素发酵史上一大创举。 链霉菌702菌株鉴定, 链霉菌702菌株分别通过培养特征、菌体形态、生理生化特征、G+C摩尔百分含量检测、细胞壁组分分析和16SrDNA序列分析结果,链霉菌702与稠李链霉菌位于系统发育树同一分支,16SrDNA序列相似度高达99%,链霉菌702菌株鉴定为稠李链霉菌JAU4234(Strepomyces padanus)。 农抗702分别对酵母菌、霉菌和14种植物病原真菌有极强抑真菌活性,尤其对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌、稻曲病菌、香蕉尖孢镰刀菌古巴转换型FOC1,FOC4生理小种均有极强的杀菌活性,研制的农抗702可湿性粉剂和水剂两种剂型的新型杀菌剂,不仅能有效防治水稻纹枯病和稻瘟病,而且能诱导水稻防御纹枯病和稻瘟病效果,达到有病能治病,无病能防病的效果。本项目为进一步研发我囯有知识产权的新型杀菌剂在理论研究和实践应用上均有重要意义。 在国内外学术刊物上发表论文16篇,其中在SCI论文1篇,国际学术期刊1篇,国内中文核心期刊11篇,全国学术会议3篇。利用本项目完成硕士学位论文4篇。