中文摘要：

研究霍乱弧菌新类型CTXφ、nct-CTXφ基因组和VPI毒力岛的结构及功能，可以揭示霍乱病原菌进化的新机制，为生物安全性霍乱减毒活菌苗的研制提供新的理论、研究策略和检验工具，为更好地防治霍乱做贡献。本项目拟对从我国1000株霍乱弧菌代表菌株中,发现的多种新类型的结构和功能进一步研究①不同rstR类型的CTXφ和nct-CTXφ基因组可共存于同一菌株中，首次发现5种不同rstR类型的共存形式，拟研究共存形式在染色体上的整合位点及相邻序列的结构、整合的机制、是否可导致基因重组，研究不同类型RstR是否有型特异性噬菌体免疫功能；②研究首次发现的4种新类型tcpA基因所在VPI毒力岛的结构和功能，以可变异的全菌性调控相关基因为主，研究不同类型TcpA免疫原性差别和交叉保护作用，电镜观察新类型TCP菌毛形态；③研究不同类型CTXφ或nct-CTXφ与不同类型TCP的关系。

结论摘要：

研究霍乱弧菌(VC)新类型CTXφ、nct-CTXφ基因组和VPI毒力岛的结构及功能，可以揭示霍乱病原菌进化的新机制，为生物安全性霍乱减毒活菌苗的研制提供新的理论基础和研究策略，为更好地防治霍乱做贡献。本研究主要取得以下成果①首次发现VC中不同rstR-ig2型nct-CTXφ和CTXφ基因组共存新类型5种，CTXφ基因组附近序列均为TLC和RTX基因簇，而nct-CTXφ基因组附近为未知或新类型序列，阐明我国VC代表株CTXφ基因组附近TLC基因簇的结构；②建立荧光定量PCR方法检测VC是否携带CTXφ和nct-CTXφ基因组及拷贝数；③首次阐明newO139和newET新类型rstA的启动子活性强度，不同类型RstR对不同类型rstA表达的调控机制；④对我国VC代表株VPI毒力岛的主要变异基因进行检测，重点对tcpA基因测序及生物学信息分析；⑤利用管家基因测序和随机引物PCR分型，阐明携带不同类型CTXφ、nct-CTXφ及VPI毒力岛的VC的分子遗传学关系。