本课题以glucoraphanin定向水解生成高抗癌活性莱菔硫烷(sulforaphane)的反应过程为应用研究体系,以不同种属来源的黑芥子酶和功能性小分子蛋白的催化反应机理为主要研究对象,探索硫苷化合物中配基重排的关键共性基础问题,揭示小分子蛋白和配基分子的相互作用规律,并通过体外重组的方式匹配最优的黑芥子酶和功能性小分子蛋白系统。研究黑芥子酶复合体、黑芥子酶和小分子蛋白的分离纯化技术,研究黑芥子酶催化反应动力学规律,研究不同水解条件对黑芥子酶水解反应和小分子蛋白功能的影响,研究功能性小分子蛋白的空间结构与定向配基重排功能的关系,以及研究体外重组黑芥子酶和功能性小分子蛋白技术。本课题的研究成果在进一步丰富黑芥子酶的基础理论研究,为利用小分子蛋白定向硫苷配基重排提供理论指导,开发高转化率、低成本、适宜大规模生产莱菔硫烷的工艺路线和新药研发等方面具有重要意义。