中文摘要：

本课题以大鼠为实验动物，于大鼠腮腺及颌下腺内注射A型肉毒毒素，观察注射后不同时间腺体的分泌情况变化及分泌液成份变化。收集标本，观察腺体内的神经末梢及神经突触变化和腺细胞及肌上皮细胞的形态及超微结构变化。采用RT-PCP和Western Blot的方法检测腺体组织内乙酰胆碱、去甲肾上腺素、P物质、血管活性肠肽、γ-氨基丁酸（GABA）等神经递质mRNA及蛋白的变化，并用放射免疫分析法检测这些神经递质于神经突触的释放情况。进一步检测A型肉毒毒素可能抑制最明显的神经递质- - 乙酰胆碱的M受体不同亚型的表达变化。同时检测A型肉毒毒素使腺细胞发生凋亡的情况以及恢复的时间。通过以上实验来探讨A型肉毒毒素对大鼠腮腺和颌下腺唾液分泌的影响和量效关系，并分析A型肉毒毒素影响唾液分泌的可能机制。本课题的研究成果，可以指导临床使用A型肉毒毒素来治疗唾液分泌过多性疾病。

结论摘要：

腺体分泌过多性疾病是口腔颌面外科领域的临床常见症，包括流涎症、涎瘘等，给患者生活造成不便并产生严重的社会心理问题，传统治疗方法疗效不确切或产生明显副作用，因此迫切需要寻找能够安全有效抑制腺体分泌的新方法。A 型肉毒毒素（botulinum toxin A，BTXA）是肉毒梭菌产生的一种神经毒素，由于疗效好毒副作用少，广泛用于肌张力障碍和痉挛性疾病的治疗。近年来BTXA开始用于治疗腺体分泌过多性疾病并初步取得较好疗效，但其量效关系、持续时间及作用机制尚不十分明确。本研究旨在探讨BTXA对唾液分泌功能的影响及其作用机制，为临床使用BTXA治疗唾液分泌过多性疾病提供指导。课题采用颌下腺导管口插管、改良施墨实验、分子生物学、激光共聚焦、流式细胞仪和电镜等研究方法，在大鼠颌下腺组织水平和体外培养腺泡细胞水平分别进行，研究发现（1）BTXA剂量依赖性抑制大鼠颌下腺唾液分泌，其抑制作用可逆，作用时间持续3-6个月；（2）BTXA导致暂时性腺泡细胞萎缩；（3）BTXA下调突触相关膜蛋白-25（SNAP-25）表达并使其从腺泡细胞顶侧膜向胞浆弥散；（4）腺泡细胞乙酰胆碱酯酶表达降低而分布不变，提示BTXA抑制神经腺体接头处乙酰胆碱的释放；（5）BTXA通过抑制水通道蛋白5（AQP5）的表达与转位阻滞水分泌的跨细胞途径；（6）BTXA对颌下腺细胞有抑增殖促凋亡作用；（7）肌上皮细胞萎缩，失去收缩、传递神经冲动功能，导致唾液分泌降低。综上所述首先，本课题为临床使用BTXA治疗腺体分泌过多性疾病提供了更为详尽的实验依据，证实腺体内注射BTXA是一种可逆性抑制腺体分泌的安全有效的方法。其次，本课题首次明确了BTXA可以通过抑制AQP5表达和转位阻碍跨细胞途径水分泌最终导致唾液分泌降低，发现了BTXA抑制唾液分泌的新机制。再次，本课题研究了BTXA对肌上皮细胞的影响以及对腺体增殖和凋亡的影响，为深入探讨BTXA影响唾液分泌的机制提供了新方向。