中文摘要：

共刺激分子B7家族在细胞免疫介导的抗肿瘤（包括淋巴肿瘤）免疫中发挥着重要作用。研究显示诱导肿瘤细胞高表达CD80，可增强机体对肿瘤的特异性免疫反应，但体内研究显示其仅对部分肿瘤有治疗作用，提示可能更多因子参与其作用通路的调节。PD-L1是近年发现的B7家族另一重要分子，与受体结合后可以提供抑制性信号。本项目拟在前期研究的基础上，构建T细胞淋巴瘤荷瘤小鼠模型，体外转染CD80至肿瘤细胞，用其高表达抗原致敏的DC刺激T细胞，同时应用抗体阻断PD-1/PD-L1通路，观察效应T细胞瘤内注射对小鼠体内肿瘤的影响，从基因、蛋白和细胞水平检测治疗前后动物免疫功能变化，并对PD-L1在肿瘤免疫中的作用机制进行研究，以探讨PD-L1与CD80在小鼠T细胞淋巴瘤免疫中的联合优势及其作用机制，并观察阻断PD-L1是否可以增强阿伦单抗的治疗效果且减少毒副反应，有助于为淋巴瘤的治疗开辟一条新的免疫治疗途径。

结论摘要：

血液系统恶性肿瘤的发病率逐年升高，通过化疗、放疗、造血干细胞移植和单克隆抗体等治疗，某些类型的恶性血液病可达到完全缓解和治愈，但仍有多数病例存在复发/难治等现象。因此，寻找新的药物、基因治疗和细胞免疫治疗等手段成为恶性血液病治疗研究的热点之一。B7家族共刺激分子在适应性免疫应答和肿瘤发生中具有重要的调节作用。目前已发现10个成员包括CD274 (PD-L1，B7-H1)和CD276 (B7-H3)等，多数研究发现PD-L1和B7-H3分子在实体肿瘤组织和细胞中异常高表达，并与疾病进展和预后较差相关，但对它们直接参与血液系统恶性肿瘤进展方面的研究甚少。本课题分别检测PD-L1和B7-H3分子在血液系统恶性肿瘤细胞株及组织中的表达情况，筛选出高表达细胞株，应用RNA干扰技术分别进行基因敲减。分别研究PD-L1和B7-H3在血液系统恶性肿瘤细胞株中，参与肿瘤细胞进展和影响化疗药物发挥抗肿瘤效应中的作用。体内外实验数据表明，PD-L1广泛表达于淋巴瘤组织和细胞系，表达率的高低与淋巴瘤的恶性程度正相关；PD-L1敲低组细胞的增殖、克隆形成、侵袭能力均低于对照（载体）组；PD-L1敲低组与顺铂联用，使肿瘤细胞的凋亡率显著增加；顺铂连同PD-L1干扰可显著缩小荷瘤小鼠肿瘤大小，延长小鼠的生存期。另一方面，靶向敲减B7-H3能够抑制急性单核细胞白血病和套细胞淋巴瘤细胞株的增殖、阻碍细胞周期进展、抑制细胞迁移和侵袭能力，增加化疗药诱导的凋亡，提高疗效。本课题的实验结果提示，PD-L1和B7-H3分子在多种血液系统恶性肿瘤细胞中高表达并促进肿瘤细胞的进展，沉默PD-L1和B7-H3基因能够显著增强肿瘤细胞对化疗的敏感性，提高疗效。因此，这种靶向PD-L1和B7-H3分子的疗法可能为恶性血液病提供一种新的治疗方式。