中文摘要：

共刺激分子受体/配体双向传递信号的观点突破了原有对共刺激分子信号传导的认识，我们发现共刺激分子4-1BBL优势表达在急性单核细胞白血病（M5）细胞表面并可介导单核白血病细胞株的增殖。本项目在原有工作的基础上拟进一步探讨4-1BBL在M5的致病机制①4-1BBL分子在大样本M5患者中的表达及与各项生物学预后指标的关系。②激发型4-1BBL单抗1F1作用于U937细胞上的4-1BBL分子，观察U937细胞的增殖、凋亡及免疫分子的表达及分泌；用U937细胞建立SCID荷瘤小鼠模型，研究单抗1F1在小鼠体内对U937细胞株生物学行为的影响；用RNAi技术阻遏4-1BBL分子,在体内和体外不同水平上进一步验证4-1BBL对U937细胞株的生物学效应。通过研究阐明4-1BBL逆向信号有可能涉及了M5的致病机制，为M5的免疫分型诊断及治疗提供新的理论依据。

结论摘要：

本课题对共刺激分子 4-1BBL在急性单核细胞白血病的表达及生物学功能以及相关的单核细胞白血病，单核巨噬系统疾病进行了研究。发现4-1BBL在400余例初治急性白血病（AL）患者中阳性表达率为18.2%，正常人骨髓为阴性；4-1BBL在急性单核细胞白血病（M5）患者中阳性表达率为53.7%； 阳性患者肿瘤负荷高、预后差；4-1BBL+M5患者中位生存期比4-1BBL-M5患者显著缩短。还分离了26例初诊AML患者的白血病细胞，与激发型4-1BBL抗体（mAb 1F1）共培养，设IgG1同型对照组，检测培养细胞的上清液中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的水平。发现mAb 1F1能明显促进4-1BBL+ AML细胞的生长，促进MMP-9的分泌。还发现了共刺激分子B7-H3在AL患者中有表达，FCM方法检测到B7-H3在134例AL患者中的阳性表达率为44.8% ；在CD34+组B7-H3表达率明显高于CD34-组；B7-H3+AL患者多伴预后差的核型，无病生存期及总体生存期均短于B7-H3-组。采用FCM、RT-PCR及激光共聚焦显微方法证明了U937细胞组成性共表达4-1BBL和CD28i分子； U937细胞用mAb 1F1刺激30min后，4-1BBL和CD28i在U937细胞表面聚集形成斑块状的共定位，提示CD28i分子可能参与了4-1BBL逆向信号的传导。用PCR结合测序方法检测了20例慢性粒-单核细胞白血病(CMML)患者中SRSF2 基因突变情况，4例伴有SRSF2基因突变，突变全部发生在P95位点，突变组及野生组的临床指标差异均无统计学意义。提示SRSF2 基因突变可能与疾病预后差有关，并可能成为CMML新的诊断标志和治疗靶点。从诊断及治疗方面对单核巨噬系统过度反应性疾病-Hemophagocytic Lymphohistocytosis(HLH)进行了研究，如sCD25、NK细胞活性、sCD163及血清中新蝶呤，18F-FDG PET/CT在HLH中的诊断意义，HLH-2004与COP方案对sHLH疗效比较以及HLH再激活患者的临床分析等等。对急性白血病的GATA-2基因变异进行了研究，已完成了Vav1-GATA-2-P304H、G320D、R362Q、wild type-poly A四种转基因载体的构建，并分别得到了4种转基因首建鼠。