一般认为乙型肝炎病毒(HBV)感染中特异性CTL细胞的杀伤作用是清除肝细胞内病毒的关键因素,但有研究发现CTL还可通过非溶细胞机制清除HBV。本研究采用HLA-A限制的HBcAg特异的CTL表位肽刺激细胞和用有限稀释法进行克隆化,从HBV感染者的外周血单个核细胞中建立表位特异性CD8+T细胞克隆;经细胞毒活性试验,从CD8+T细胞克隆中筛选出14株低(无)细胞毒活性的CD8+T克隆,并对克隆株的HLA-A基因型-限制性表位-表位肽的氨基酸序列进行了鉴定和确认。选取HLA-A匹配的低(无)细胞毒活性的CTL克隆(效应细胞)与HepG2.2.15肝癌细胞系(靶细胞)共同培养,上清液可检出高水平IFN-γ和低水平TNF-α,而由靶细胞分泌至上清液中的HBsAg、HBeAg和HBV DNA含量明显下降,表明靶细胞的HBV复制受到抑制。在效应细胞与靶细胞共同培养时,针对细胞因子的特异性抗体中和试验能降低对HBV复制的抑制率,支持和证实CTL非溶细胞作用抑制HBV复制主要是由IFN-γ和TNF-α介导的。
英文主题词hepatitis B;HBcAg;cytotoxic T lymphocyte;epitope; cytokine