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乙型肝炎患者HBcAg特异性非溶细胞性CTL克隆的建立及其表位的鉴定
  • 项目名称:乙型肝炎患者HBcAg特异性非溶细胞性CTL克隆的建立及其表位的鉴定
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30671929
  • 申请代码:H1005
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2007-01-01-2009-12-31
  • 项目负责人:郑纪山
  • 负责人职称:研究员
  • 依托单位:中国人民解放军南京军区军事医学研究所
  • 批准年度:2006
中文摘要:

一般认为乙型肝炎病毒(HBV)感染中特异性CTL细胞的杀伤作用是清除肝细胞内病毒的关键因素,但有研究发现CTL还可通过非溶细胞机制清除HBV。本研究采用HLA-A限制的HBcAg特异的CTL表位肽刺激细胞和用有限稀释法进行克隆化,从HBV感染者的外周血单个核细胞中建立表位特异性CD8+T细胞克隆;经细胞毒活性试验,从CD8+T细胞克隆中筛选出14株低(无)细胞毒活性的CD8+T克隆,并对克隆株的HLA-A基因型-限制性表位-表位肽的氨基酸序列进行了鉴定和确认。选取HLA-A匹配的低(无)细胞毒活性的CTL克隆(效应细胞)与HepG2.2.15肝癌细胞系(靶细胞)共同培养,上清液可检出高水平IFN-γ和低水平TNF-α,而由靶细胞分泌至上清液中的HBsAg、HBeAg和HBV DNA含量明显下降,表明靶细胞的HBV复制受到抑制。在效应细胞与靶细胞共同培养时,针对细胞因子的特异性抗体中和试验能降低对HBV复制的抑制率,支持和证实CTL非溶细胞作用抑制HBV复制主要是由IFN-γ和TNF-α介导的。

结论摘要:

英文主题词hepatitis B;HBcAg;cytotoxic T lymphocyte;epitope; cytokine


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