植物细菌性根癌病是我国桃和樱桃等核果类果树最为严重的根部病害之一,生产上尚无彻底有效的防治措施。根据根癌病的发病机理,通过植物基因工程构建野生根癌农杆菌致癌基因RNA干扰基因沉默植物表达载体,转化获得转基因植株,农杆菌一旦侵染使致癌基因表达沉默抑制肿瘤的形成和危害。目前,从桃和樱桃田间感病植株中,分离鉴定获得不同类型根癌农杆菌株系42份;通过PCR获得致癌相关基因iaaM和ipt,构建了致癌基因RNAi基因沉默植物表达载体;建立起樱桃砧木CAB-6p、Gisela 6和桃砧木Nemaguard高效离体再生和遗传转化技术体系,CAB-6p和Gisela 6再生率可以稳定地保持在90%左右,Nemaguard在70%左右,平均每叶再生约5个不定芽,根癌农杆菌介导遗传转化率约0.5~1.0%,并且实验的重复稳定性表现很好,可以方便有效地开展外源功能基因的遗传转化研究;樱桃砧木CAB-6p筛选获得KanR株系23份,Gisela 6筛选获得KanR株系15份,PCR分析检测证实基因的导入;桃砧木Nemaguard的遗传转化工作正在进行中。以上工作的完成为下一步继续深入研究奠定坚实的基础。
英文主题词peach; cherry; crown gall; RNAi; plant transformation