现代研究证实,视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)凋亡是视神经继发损伤的重要因素。重明益损汤经临床研究证明对外伤性视神经病变的较好疗效。为进一步研究重明益损汤的视神经保护作用机制,我们设计了本课题。本课题首先采用体外细胞培养的方法获得大鼠RGCs,采用谷氨酸作为细胞凋亡诱导剂建立RGCs凋亡模型,并用不同浓度重明益损汤药物血清、黄芪注射液等加入细胞培养基进行干预,分别用MTT和流式细胞检测的方法进行细胞存活率及细胞凋亡相关检测。体内实验则采用钳夹法造成大鼠视神经直接损伤后,再给予大鼠灌胃重明益损汤煎煮剂,采用荧光金逆行标记方法进行视网膜神经节细胞染色,铺片计数并计算RGCs存活率。通过本部分实验,我们证实重明益损汤药物血清及黄芪注射液作为视神经保护中药制剂对RGCs均具有一定保护作用,其作用机制很可能跟抑制谷氨酸兴奋性毒性作用、下调Bax蛋白的表达有关。体内试验部分,由于实验使用的最小夹持冲量偏大,造成大鼠视神经受损过重,使钳夹伤动物模型制作存在一定局限性,在进一步的中药干实验中,药物灌胃组RGCs存活率较对照组无明显提高。
英文主题词retinal ganglion cells;apoptosis;Chongmingyisun Decoction;