中文摘要：

肥大细胞是特化分泌细胞，分泌重要生理活性物。前期研究发现低剂量(1-5 microW.cm-2)UVA刺激腹腔肥大细胞发生胞浆钙振荡和胞吐。UVA依次激活NAD(P)H oxidase (NOX)导致ROS的产生，ROS激活磷脂水解酶C触发胞浆钙振荡，进而刺激肥大细胞发生胞吐。外源性H2O2和超氧阴离子部分模拟UVA作用。单个腹腔肥大细胞荧光发射光谱显示NAD(P)H的特征发射峰。揭示NOX在UVA诱发肥大细胞胞浆钙振荡中的重要作用。项目将研究肥大细胞RBL-2H3不同NOX亚型(NOX1-5, DUOX1/2)和亚基NOXA (p67)、NOXO (p47/p40)、p22phox的表达和亚细胞分布，及其被siRNA下调后，UVA所介导的ROS产生、胞浆钙振荡、单个肥大细胞胞吐的变化。研究对于免疫调控、信号编码，具有重要科学意义和潜在实际应用价值。

结论摘要：

到达地球表面的日光中主要紫外光波段UVA (320-400 nm)具有免疫抑制和抗炎作用，但其所涉及的分子机制并不清楚。本文发现UVA在大鼠腹腔肥大细胞、RBL-2H3、BMMC均光强依赖性引发细胞胞浆钙离子浓度的振荡样增加，与抗原-IgE抗体-FcεRI型受体激活所触发的胞浆钙振荡类似。RT-PCR试验发现RBL-2H3细胞高表达NOX2及其调控亚基p22phox、p67phox、p47phox、p40phox、Rac1及Rac2，低表达DUOX2，不表达NOX1、3、4、5、DUOX1及胞浆亚基NOXO1、NOXA1。免疫细胞化学试验发现腹腔肥大细胞、RBL-2H3细胞中NOX2和p22phox均分布在质膜及胞内囊泡膜，p47phox、p67phox、p40phox、Rac1/2分布于胞浆；BMMC中NOX2、P47、Rac1/2显示类似结果。NOX特异性抑制剂diphenyleneiodonium (DPI) 50 ？M和活性氧(ROS)清除剂N - acety-L-cysteine (NAC) 2 mM完全抑制UVA诱导的活性氧发生；NOX2、p22phox、p47phox的siRNA敲低，均显著抑制UVA诱导的ROS的产生。NOX2、p22phox、p47phox达的siRNA敲低也显著抑制UVA诱导的细胞因子IL-6和LTC4释放。上述结果共同说明，NOX2在UVA触发肥大细胞活性氧产生及细胞因子的释放过程中具有关键作用。